生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2009年
9期
107-110
,共4页
梅花鹿FSHβ亚基%基因克隆%融合表达
梅花鹿FSHβ亞基%基因剋隆%融閤錶達
매화록FSHβ아기%기인극륭%융합표체
以原构建的克隆载体为模板,PCR扩增梅花鹿FSHβ亚基基因,TA克隆后经双酶切插入表达载体pGEX-6P-2,阳性克隆导入E.coli BL21,IPTG诱导表达GST-FSHβ融合蛋白,SDS-PAGE进行分析鉴定.结果显示,FSHβ PCR产物大小约410 bp,测序结果与GenBank序列一致,成功构建了重组表达载体pGEX-6P-2-FSHβ,融合蛋白经SDS-PAGE分析,在相对分子量39.5 kD处,出现特异性蛋白条带,说明梅花鹿FSHβ亚基基因片段已在E.coli BL21中成功表达了FSHβ-GST融合蛋白,融合蛋白功能有待进一步分析.
以原構建的剋隆載體為模闆,PCR擴增梅花鹿FSHβ亞基基因,TA剋隆後經雙酶切插入錶達載體pGEX-6P-2,暘性剋隆導入E.coli BL21,IPTG誘導錶達GST-FSHβ融閤蛋白,SDS-PAGE進行分析鑒定.結果顯示,FSHβ PCR產物大小約410 bp,測序結果與GenBank序列一緻,成功構建瞭重組錶達載體pGEX-6P-2-FSHβ,融閤蛋白經SDS-PAGE分析,在相對分子量39.5 kD處,齣現特異性蛋白條帶,說明梅花鹿FSHβ亞基基因片段已在E.coli BL21中成功錶達瞭FSHβ-GST融閤蛋白,融閤蛋白功能有待進一步分析.
이원구건적극륭재체위모판,PCR확증매화록FSHβ아기기인,TA극륭후경쌍매절삽입표체재체pGEX-6P-2,양성극륭도입E.coli BL21,IPTG유도표체GST-FSHβ융합단백,SDS-PAGE진행분석감정.결과현시,FSHβ PCR산물대소약410 bp,측서결과여GenBank서렬일치,성공구건료중조표체재체pGEX-6P-2-FSHβ,융합단백경SDS-PAGE분석,재상대분자량39.5 kD처,출현특이성단백조대,설명매화록FSHβ아기기인편단이재E.coli BL21중성공표체료FSHβ-GST융합단백,융합단백공능유대진일보분석.
