上海师范大学学报（自然科学版）
上海師範大學學報（自然科學版）
상해사범대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SHANGHAI TEACHERS UNIVERSITY(NATURAL SCIENCES)
2010年
2期
175-180
,共6页
周茜%曹志林%俞俞%杨仲南
週茜%曹誌林%俞俞%楊仲南
주천%조지림%유유%양중남
原核表达%拟南芥%转录因子%TDF1%融合蛋白%多克隆抗体
原覈錶達%擬南芥%轉錄因子%TDF1%融閤蛋白%多剋隆抗體
원핵표체%의남개%전록인자%TDF1%융합단백%다극륭항체
在拟南芥花药发育过程中,MYB家族转录因子TDF1在调控绒毡层发育及后期功能上起到关键的作用.利用PCR方法扩增TDF1基因并克隆到原核表达载体pET-32a.将表达载体TDF1-pET32a转入大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG成功诱导表达了分子量约为56KD的TDF1融合蛋白.该融合蛋白主要以包涵体形式存在,分离出包涵体后进行可溶性处理作为抗原免疫家兔.制备出的多克隆抗血清经ELISA测定效价为1∶2560,Western blot检测表明该抗血清与TDF1融合蛋白识别良好.TDF1抗体的制备有助于进一步从生化水平上研究TDF1在花药发育中的功能.
在擬南芥花藥髮育過程中,MYB傢族轉錄因子TDF1在調控絨氈層髮育及後期功能上起到關鍵的作用.利用PCR方法擴增TDF1基因併剋隆到原覈錶達載體pET-32a.將錶達載體TDF1-pET32a轉入大腸桿菌BL21(DE3),用IPTG成功誘導錶達瞭分子量約為56KD的TDF1融閤蛋白.該融閤蛋白主要以包涵體形式存在,分離齣包涵體後進行可溶性處理作為抗原免疫傢兔.製備齣的多剋隆抗血清經ELISA測定效價為1∶2560,Western blot檢測錶明該抗血清與TDF1融閤蛋白識彆良好.TDF1抗體的製備有助于進一步從生化水平上研究TDF1在花藥髮育中的功能.
재의남개화약발육과정중,MYB가족전록인자TDF1재조공융전층발육급후기공능상기도관건적작용.이용PCR방법확증TDF1기인병극륭도원핵표체재체pET-32a.장표체재체TDF1-pET32a전입대장간균BL21(DE3),용IPTG성공유도표체료분자량약위56KD적TDF1융합단백.해융합단백주요이포함체형식존재,분리출포함체후진행가용성처리작위항원면역가토.제비출적다극륭항혈청경ELISA측정효개위1∶2560,Western blot검측표명해항혈청여TDF1융합단백식별량호.TDF1항체적제비유조우진일보종생화수평상연구TDF1재화약발육중적공능.
