中国动物检疫
中國動物檢疫
중국동물검역
CHINA ANMAL QUARANTINE
2010年
5期
31-33
,共3页
程昀静%张利仙%段纲%艾军%龙云凤%董俊%严树发%周晓黎
程昀靜%張利仙%段綱%艾軍%龍雲鳳%董俊%嚴樹髮%週曉黎
정윤정%장리선%단강%애군%룡운봉%동준%엄수발%주효려
猴D型逆转录病毒%P27基因%表达%纯化
猴D型逆轉錄病毒%P27基因%錶達%純化
후D형역전록병독%P27기인%표체%순화
根据GenBank上已发表的猴D型逆转录病毒SRV-2株基因组序列设计合成了一对特异性引物,通过PCR扩增出P27基因.将扩增出的片段克隆到原核表达载体pBAD/Thio-TOPO上,通过序列分析证实该片段与猴D型逆转录病毒SRV-2株P27基因序列一致,将阳性重组质粒转化至大肠杆菌TOPO10中,用阿拉伯糖诱导表达,表达的融合蛋白进行SDS-PAGE和WesternBlot分析,并用proBondTM柱在天然状态下进行纯化.结果表明,表达的融合蛋白分子量约为50KDa,其大小与预期相符.
根據GenBank上已髮錶的猴D型逆轉錄病毒SRV-2株基因組序列設計閤成瞭一對特異性引物,通過PCR擴增齣P27基因.將擴增齣的片段剋隆到原覈錶達載體pBAD/Thio-TOPO上,通過序列分析證實該片段與猴D型逆轉錄病毒SRV-2株P27基因序列一緻,將暘性重組質粒轉化至大腸桿菌TOPO10中,用阿拉伯糖誘導錶達,錶達的融閤蛋白進行SDS-PAGE和WesternBlot分析,併用proBondTM柱在天然狀態下進行純化.結果錶明,錶達的融閤蛋白分子量約為50KDa,其大小與預期相符.
근거GenBank상이발표적후D형역전록병독SRV-2주기인조서렬설계합성료일대특이성인물,통과PCR확증출P27기인.장확증출적편단극륭도원핵표체재체pBAD/Thio-TOPO상,통과서렬분석증실해편단여후D형역전록병독SRV-2주P27기인서렬일치,장양성중조질립전화지대장간균TOPO10중,용아랍백당유도표체,표체적융합단백진행SDS-PAGE화WesternBlot분석,병용proBondTM주재천연상태하진행순화.결과표명,표체적융합단백분자량약위50KDa,기대소여예기상부.
