现代肿瘤医学
現代腫瘤醫學
현대종류의학
JOURNAL OF MODERN ONCOLOGY
2011年
5期
863-866
,共4页
李慧%彭扬%牛慧彦%何平
李慧%彭颺%牛慧彥%何平
리혜%팽양%우혜언%하평
Ubc9%真核表达%基因克隆%载体构建
Ubc9%真覈錶達%基因剋隆%載體構建
Ubc9%진핵표체%기인극륭%재체구건
目的:克隆人类Ubc9基因cDNA全长,构建Ubc9的真核表达载体并表达.方法:采用RT-PCR技术从人小细胞肺癌NCI-H446细胞总RNA中扩增Ubc9 cDNA基因片段,经过酶切鉴定后,克隆至pUCM-T载体,测序证实碱基序列无误后,再克隆至真核绿色荧光蛋白表达载体(pEGFP-N1)上,并转染到真核细胞,观察其在真核细胞中的表达.结果:测序证实克隆的Ubc9全长cDNA阅读框正确完整,酶切和序列测定证实Ubc9正确插入pEGFP-N1载体中,该重组载体能够在真核细胞中表达.结论:成功构建了真核表达载体pEGFP-N1-Ubc9.
目的:剋隆人類Ubc9基因cDNA全長,構建Ubc9的真覈錶達載體併錶達.方法:採用RT-PCR技術從人小細胞肺癌NCI-H446細胞總RNA中擴增Ubc9 cDNA基因片段,經過酶切鑒定後,剋隆至pUCM-T載體,測序證實堿基序列無誤後,再剋隆至真覈綠色熒光蛋白錶達載體(pEGFP-N1)上,併轉染到真覈細胞,觀察其在真覈細胞中的錶達.結果:測序證實剋隆的Ubc9全長cDNA閱讀框正確完整,酶切和序列測定證實Ubc9正確插入pEGFP-N1載體中,該重組載體能夠在真覈細胞中錶達.結論:成功構建瞭真覈錶達載體pEGFP-N1-Ubc9.
목적:극륭인류Ubc9기인cDNA전장,구건Ubc9적진핵표체재체병표체.방법:채용RT-PCR기술종인소세포폐암NCI-H446세포총RNA중확증Ubc9 cDNA기인편단,경과매절감정후,극륭지pUCM-T재체,측서증실감기서렬무오후,재극륭지진핵록색형광단백표체재체(pEGFP-N1)상,병전염도진핵세포,관찰기재진핵세포중적표체.결과:측서증실극륭적Ubc9전장cDNA열독광정학완정,매절화서렬측정증실Ubc9정학삽입pEGFP-N1재체중,해중조재체능구재진핵세포중표체.결론:성공구건료진핵표체재체pEGFP-N1-Ubc9.
