海洋通报
海洋通報
해양통보
MARINE SCIENCE BULLETIN
2011年
4期
430-434
,共5页
张晓君%阎斌伦%梁利国%秦国民%毕可然
張曉君%閻斌倫%樑利國%秦國民%畢可然
장효군%염빈륜%량리국%진국민%필가연
半滑舌鳎%鳗利斯顿氏菌%溶血素基因%金属蛋白酶基因%双重PCR
半滑舌鰨%鰻利斯頓氏菌%溶血素基因%金屬蛋白酶基因%雙重PCR
반활설탑%만리사돈씨균%용혈소기인%금속단백매기인%쌍중PCR
对引起江苏连云港工厂化养殖半滑舌鳎大量死亡的病原鳗利斯顿氏菌,进行了基于溶血素和金属蛋白酶两种基因的双重PCR检测.根据鳗利斯顿氏菌溶血素基因和金属蛋白酶基因序列设计2对特异性引物,在同一PCR反应体系中,鳗利斯顿氏菌可同时扩增出上述2种基因片段,扩增片段大小分别为493 bp和248bp,两对引物对5种其他水产动物病原菌无交叉反应,敏感性检测结果为该双重PCR最低能检测8× 102 CFU/mL的鳗利斯顿氏菌,最低能检测0.171 875 ng/μL的鳗利斯顿氏菌基因组DNA.对发病半滑舌鳎溃疡组织、肝脏及养殖用水进行双重PCR检测,呈阳性反应的样品可分离出优势生长的鳗利斯顿氏菌.该实验表明两种不同基因综合检测病原鳗利斯顿氏菌,进一步提高了其PCR检测的准确性和特异性,建立了一种病原鳗利斯顿氏菌快速、准确的双重PCR检测方法.
對引起江囌連雲港工廠化養殖半滑舌鰨大量死亡的病原鰻利斯頓氏菌,進行瞭基于溶血素和金屬蛋白酶兩種基因的雙重PCR檢測.根據鰻利斯頓氏菌溶血素基因和金屬蛋白酶基因序列設計2對特異性引物,在同一PCR反應體繫中,鰻利斯頓氏菌可同時擴增齣上述2種基因片段,擴增片段大小分彆為493 bp和248bp,兩對引物對5種其他水產動物病原菌無交扠反應,敏感性檢測結果為該雙重PCR最低能檢測8× 102 CFU/mL的鰻利斯頓氏菌,最低能檢測0.171 875 ng/μL的鰻利斯頓氏菌基因組DNA.對髮病半滑舌鰨潰瘍組織、肝髒及養殖用水進行雙重PCR檢測,呈暘性反應的樣品可分離齣優勢生長的鰻利斯頓氏菌.該實驗錶明兩種不同基因綜閤檢測病原鰻利斯頓氏菌,進一步提高瞭其PCR檢測的準確性和特異性,建立瞭一種病原鰻利斯頓氏菌快速、準確的雙重PCR檢測方法.
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