农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2012年
1期
105-112
,共8页
猪%肌肉%双向电泳%蛋白质组学%分析
豬%肌肉%雙嚮電泳%蛋白質組學%分析
저%기육%쌍향전영%단백질조학%분석
为建立和优化猪肌肉组织蛋白质双向电泳技术,从提取方法、加样量、IPG胶条的选择、SDS-PAGE胶浓度、染色方法等多个方面对双向电泳分离效果进行比较研究.结果显示,液氮研磨+超声破碎法提取猪肌肉组织蛋白效果优于液氮研磨法,前者细胞破碎彻底蛋白质溶解性好且核酸污染少,图谱质量较好;18cm pH 4~7的IPG胶条分离效果比pH 3~10非线性IPG胶条好;对于银染,18 cm pH 4~7的IPG胶条150μg上样量比较适宜;同一肌肉样品的三块胶的重复性可达70%以上;同时,对双向电泳过程中的典型问题作了详尽分析.研究结果表明,通过优化的双向电泳条件获得了较高分辨率和较好重复性的猪肌肉组织双向电泳图谱,可用于后续蛋白质组学分析.
為建立和優化豬肌肉組織蛋白質雙嚮電泳技術,從提取方法、加樣量、IPG膠條的選擇、SDS-PAGE膠濃度、染色方法等多箇方麵對雙嚮電泳分離效果進行比較研究.結果顯示,液氮研磨+超聲破碎法提取豬肌肉組織蛋白效果優于液氮研磨法,前者細胞破碎徹底蛋白質溶解性好且覈痠汙染少,圖譜質量較好;18cm pH 4~7的IPG膠條分離效果比pH 3~10非線性IPG膠條好;對于銀染,18 cm pH 4~7的IPG膠條150μg上樣量比較適宜;同一肌肉樣品的三塊膠的重複性可達70%以上;同時,對雙嚮電泳過程中的典型問題作瞭詳儘分析.研究結果錶明,通過優化的雙嚮電泳條件穫得瞭較高分辨率和較好重複性的豬肌肉組織雙嚮電泳圖譜,可用于後續蛋白質組學分析.
위건립화우화저기육조직단백질쌍향전영기술,종제취방법、가양량、IPG효조적선택、SDS-PAGE효농도、염색방법등다개방면대쌍향전영분리효과진행비교연구.결과현시,액담연마+초성파쇄법제취저기육조직단백효과우우액담연마법,전자세포파쇄철저단백질용해성호차핵산오염소,도보질량교호;18cm pH 4~7적IPG효조분리효과비pH 3~10비선성IPG효조호;대우은염,18 cm pH 4~7적IPG효조150μg상양량비교괄의;동일기육양품적삼괴효적중복성가체70%이상;동시,대쌍향전영과정중적전형문제작료상진분석.연구결과표명,통과우화적쌍향전영조건획득료교고분변솔화교호중복성적저기육조직쌍향전영도보,가용우후속단백질조학분석.