华中农业大学学报
華中農業大學學報
화중농업대학학보
JOURNAL OF HUAZHONG AGRICULTURAL UNIVERSITY
2006年
5期
474-478
,共5页
林艺远%刘国平%吴斌%赵战勤%陈焕春
林藝遠%劉國平%吳斌%趙戰勤%陳煥春
림예원%류국평%오빈%조전근%진환춘
产类志贺毒素大肠杆菌%猪水肿病%SLT-IIeB%克隆%序列分析%原核表达
產類誌賀毒素大腸桿菌%豬水腫病%SLT-IIeB%剋隆%序列分析%原覈錶達
산류지하독소대장간균%저수종병%SLT-IIeB%극륭%서렬분석%원핵표체
以湖北本地分离的致猪水肿病大肠杆菌鄂E株为模板,PCR扩增去掉信号肽和跨膜区的SLT-IIB基因,将其克隆到原核表达载体pGEX-KG.同时对筛选出的阳性质粒pGEX-SLT-IIeB进行测序,测序结果与Genbank上发表的12个SLT-IIeB基因序列的同源性达100%,表明该基因保守性很好.重组质粒pGEX-SLT-IIeB经IPTG诱导后在大肠杆菌中实现了表达,SDS-PAGE分析表明表达产物GST-SLT-IIeB有特异性表达带,Western-blot检测证实表达产物具有免疫反应性.
以湖北本地分離的緻豬水腫病大腸桿菌鄂E株為模闆,PCR擴增去掉信號肽和跨膜區的SLT-IIB基因,將其剋隆到原覈錶達載體pGEX-KG.同時對篩選齣的暘性質粒pGEX-SLT-IIeB進行測序,測序結果與Genbank上髮錶的12箇SLT-IIeB基因序列的同源性達100%,錶明該基因保守性很好.重組質粒pGEX-SLT-IIeB經IPTG誘導後在大腸桿菌中實現瞭錶達,SDS-PAGE分析錶明錶達產物GST-SLT-IIeB有特異性錶達帶,Western-blot檢測證實錶達產物具有免疫反應性.
이호북본지분리적치저수종병대장간균악E주위모판,PCR확증거도신호태화과막구적SLT-IIB기인,장기극륭도원핵표체재체pGEX-KG.동시대사선출적양성질립pGEX-SLT-IIeB진행측서,측서결과여Genbank상발표적12개SLT-IIeB기인서렬적동원성체100%,표명해기인보수성흔호.중조질립pGEX-SLT-IIeB경IPTG유도후재대장간균중실현료표체,SDS-PAGE분석표명표체산물GST-SLT-IIeB유특이성표체대,Western-blot검측증실표체산물구유면역반응성.
