四川医学
四川醫學
사천의학
SICHUAN MEDICAL JOURNAL
2007年
6期
575-577
,共3页
高坤%镐英杰%张晖%裴福兴
高坤%鎬英傑%張暉%裴福興
고곤%호영걸%장휘%배복흥
核激活因子受体配体%RNA干扰%大鼠,成骨细胞%基因沉默
覈激活因子受體配體%RNA榦擾%大鼠,成骨細胞%基因沉默
핵격활인자수체배체%RNA간우%대서,성골세포%기인침묵
目的 利用RNA干扰(RNAi)技术抑制大鼠成骨细胞核激活因子受体配体(Ligand of receptor activator of NF-κB,RANKL)的表达,观察成骨细胞RANKL/OPG比值的变化,探讨成骨细胞与破骨细胞生成的相关性.方法 合成4条RANKL序列特异性小干扰RNA(siRNA),用Liopfectamin2000转染成骨细胞,采用荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)检测RANKL的表达,筛选出最有效的干扰序列,并用Westemblot技术检测成骨细胞的RANKL、OPG的表达,观察RANKL/OPG比例的变化,采用成骨细胞破骨细胞共培养技术探讨转染后的成骨细胞对破骨细胞生成的影响.结果 合成的4对siRNA中有一对可使大鼠成骨细胞的RANKL mRNA水平下降89%,蛋白表达下降76%;同时OPG的蛋白表达无明显变化,RANKL/OPG比例明显下调,破骨细胞的生成明显受到抑制.结论 RNAi沉默RANKL基因表达可显著下调成骨细胞RANKL/OPG的比值,抑制破骨细胞的生成.
目的 利用RNA榦擾(RNAi)技術抑製大鼠成骨細胞覈激活因子受體配體(Ligand of receptor activator of NF-κB,RANKL)的錶達,觀察成骨細胞RANKL/OPG比值的變化,探討成骨細胞與破骨細胞生成的相關性.方法 閤成4條RANKL序列特異性小榦擾RNA(siRNA),用Liopfectamin2000轉染成骨細胞,採用熒光實時定量聚閤酶鏈反應(PCR)檢測RANKL的錶達,篩選齣最有效的榦擾序列,併用Westemblot技術檢測成骨細胞的RANKL、OPG的錶達,觀察RANKL/OPG比例的變化,採用成骨細胞破骨細胞共培養技術探討轉染後的成骨細胞對破骨細胞生成的影響.結果 閤成的4對siRNA中有一對可使大鼠成骨細胞的RANKL mRNA水平下降89%,蛋白錶達下降76%;同時OPG的蛋白錶達無明顯變化,RANKL/OPG比例明顯下調,破骨細胞的生成明顯受到抑製.結論 RNAi沉默RANKL基因錶達可顯著下調成骨細胞RANKL/OPG的比值,抑製破骨細胞的生成.
목적 이용RNA간우(RNAi)기술억제대서성골세포핵격활인자수체배체(Ligand of receptor activator of NF-κB,RANKL)적표체,관찰성골세포RANKL/OPG비치적변화,탐토성골세포여파골세포생성적상관성.방법 합성4조RANKL서렬특이성소간우RNA(siRNA),용Liopfectamin2000전염성골세포,채용형광실시정량취합매련반응(PCR)검측RANKL적표체,사선출최유효적간우서렬,병용Westemblot기술검측성골세포적RANKL、OPG적표체,관찰RANKL/OPG비례적변화,채용성골세포파골세포공배양기술탐토전염후적성골세포대파골세포생성적영향.결과 합성적4대siRNA중유일대가사대서성골세포적RANKL mRNA수평하강89%,단백표체하강76%;동시OPG적단백표체무명현변화,RANKL/OPG비례명현하조,파골세포적생성명현수도억제.결론 RNAi침묵RANKL기인표체가현저하조성골세포RANKL/OPG적비치,억제파골세포적생성.
