四川动物
四川動物
사천동물
SICHUAN JOURNAL OF ZOOLOGY
2008年
2期
273-276
,共4页
朱晓燕%王雅静%杨树国%毕世樑%廖琳
硃曉燕%王雅靜%楊樹國%畢世樑%廖琳
주효연%왕아정%양수국%필세량%료림
阴道毛滴虫%黏附蛋白65-3%原核表达质粒%基因表达
陰道毛滴蟲%黏附蛋白65-3%原覈錶達質粒%基因錶達
음도모적충%점부단백65-3%원핵표체질립%기인표체
质粒 pMD-18T-ap65-3 经 Xho I 和 BamH I 双酶切, 1.0% 凝胶电泳后纯化回收阴道毛滴虫黏附蛋白 65-3 基因,定向克隆至原核表达载体 pET-32a(+), 构建原核表达质粒 pET32a-ap65-3. 重组质粒转化大肠埃希菌 JM109 感受态细胞中, 筛选阳性克隆, 进行PCR﹑酶切及测序鉴定正确后, 将重组质粒 pET32a-ap65-3 转化于大肠埃希菌 BL21 中,异丙基-β-D硫代半乳糖苷 (IPTG) 诱导重组蛋白表达后利用十二烷基磺酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE) 和免疫印迹 (Western blot) 对重组蛋白进行分析鉴定. 本实验为研究阴道毛滴虫病的致病机制及蛋白生物学功能奠定了基础.
質粒 pMD-18T-ap65-3 經 Xho I 和 BamH I 雙酶切, 1.0% 凝膠電泳後純化迴收陰道毛滴蟲黏附蛋白 65-3 基因,定嚮剋隆至原覈錶達載體 pET-32a(+), 構建原覈錶達質粒 pET32a-ap65-3. 重組質粒轉化大腸埃希菌 JM109 感受態細胞中, 篩選暘性剋隆, 進行PCR﹑酶切及測序鑒定正確後, 將重組質粒 pET32a-ap65-3 轉化于大腸埃希菌 BL21 中,異丙基-β-D硫代半乳糖苷 (IPTG) 誘導重組蛋白錶達後利用十二烷基磺痠鈉一聚丙烯酰胺凝膠電泳 (SDS-PAGE) 和免疫印跡 (Western blot) 對重組蛋白進行分析鑒定. 本實驗為研究陰道毛滴蟲病的緻病機製及蛋白生物學功能奠定瞭基礎.
질립 pMD-18T-ap65-3 경 Xho I 화 BamH I 쌍매절, 1.0% 응효전영후순화회수음도모적충점부단백 65-3 기인,정향극륭지원핵표체재체 pET-32a(+), 구건원핵표체질립 pET32a-ap65-3. 중조질립전화대장애희균 JM109 감수태세포중, 사선양성극륭, 진행PCR﹑매절급측서감정정학후, 장중조질립 pET32a-ap65-3 전화우대장애희균 BL21 중,이병기-β-D류대반유당감 (IPTG) 유도중조단백표체후이용십이완기광산납일취병희선알응효전영 (SDS-PAGE) 화면역인적 (Western blot) 대중조단백진행분석감정. 본실험위연구음도모적충병적치병궤제급단백생물학공능전정료기출.
