中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2008年
3期
190-193
,共4页
都小夏%王桂琴%王艳红%李凌霞%郭松佳%兰晶
都小夏%王桂琴%王豔紅%李凌霞%郭鬆佳%蘭晶
도소하%왕계금%왕염홍%리릉하%곽송가%란정
核心蛋白聚糖%巴氏毕赤酵母%表达%活性
覈心蛋白聚糖%巴氏畢赤酵母%錶達%活性
핵심단백취당%파씨필적효모%표체%활성
目的 利用巴氏毕赤酵母真核表达系统表达人核心蛋白聚糖DCN,并检测其抗肿瘤活性.方法 利用DCN的特异引物,通过RT-PCR扩增人DCN基因,与载体pPIC9K连接,将序列正确的重组体扩增后,酶切线性化,通过醋酸锂法转化酵母菌HIS/GS115,G418筛选阳性克隆,用含1%甲醇的BMMY培养基诱导表达,并观察纯化的表达产物对人肝母细胞瘤细胞(HepG2)增殖的影响.结果 表达产物作用于HepG2细胞后,与对照组相比,细胞增殖数量及速度均显著降低.随着表达产物浓度的升高及作用时间的延长,抑制作用也增强,并表现出浓度和时间依赖性关系.细胞形态学观察表明DCN对HepG2生长有明显抑制作用.结论 已成功构建了pPICgK-DCN真核表达载体,并表达了有活性的蛋白产物.
目的 利用巴氏畢赤酵母真覈錶達繫統錶達人覈心蛋白聚糖DCN,併檢測其抗腫瘤活性.方法 利用DCN的特異引物,通過RT-PCR擴增人DCN基因,與載體pPIC9K連接,將序列正確的重組體擴增後,酶切線性化,通過醋痠鋰法轉化酵母菌HIS/GS115,G418篩選暘性剋隆,用含1%甲醇的BMMY培養基誘導錶達,併觀察純化的錶達產物對人肝母細胞瘤細胞(HepG2)增殖的影響.結果 錶達產物作用于HepG2細胞後,與對照組相比,細胞增殖數量及速度均顯著降低.隨著錶達產物濃度的升高及作用時間的延長,抑製作用也增彊,併錶現齣濃度和時間依賴性關繫.細胞形態學觀察錶明DCN對HepG2生長有明顯抑製作用.結論 已成功構建瞭pPICgK-DCN真覈錶達載體,併錶達瞭有活性的蛋白產物.
목적 이용파씨필적효모진핵표체계통표체인핵심단백취당DCN,병검측기항종류활성.방법 이용DCN적특이인물,통과RT-PCR확증인DCN기인,여재체pPIC9K련접,장서렬정학적중조체확증후,매절선성화,통과작산리법전화효모균HIS/GS115,G418사선양성극륭,용함1%갑순적BMMY배양기유도표체,병관찰순화적표체산물대인간모세포류세포(HepG2)증식적영향.결과 표체산물작용우HepG2세포후,여대조조상비,세포증식수량급속도균현저강저.수착표체산물농도적승고급작용시간적연장,억제작용야증강,병표현출농도화시간의뢰성관계.세포형태학관찰표명DCN대HepG2생장유명현억제작용.결론 이성공구건료pPICgK-DCN진핵표체재체,병표체료유활성적단백산물.
