华南农业大学学报
華南農業大學學報
화남농업대학학보
JOURNAL OF SOUTH CHINA AGRICULTURAL UNIVERSITY
2009年
3期
18-21
,共4页
何云蔚%陈秀%阮小蕾%沈文锦%刘福秀%李华平
何雲蔚%陳秀%阮小蕾%瀋文錦%劉福秀%李華平
하운위%진수%원소뢰%침문금%류복수%리화평
香焦线条病毒%ORFⅠ%原核表达%抗血清
香焦線條病毒%ORFⅠ%原覈錶達%抗血清
향초선조병독%ORFⅠ%원핵표체%항혈청
利用PCR方法从含香蕉线条病毒广东分离物(BSV-GD)部分基因组的质粒中扩增该病毒的ORF Ⅰ基因,将其克隆到pET-28b(+)原核表达载体中进行了融合表达.SDS-PAGE电泳发现,目的融合蛋白与预期大小一致,相对分子质量约为23 000,表达产物主要以不可溶的包涵体形式存在,将其变性溶解后利用N端的组氨酸标签进行纯化.以纯化产物为抗原免疫兔子制备了香蕉线条病毒的阳性兔抗血清,Western blot和ELISA分析表明,制备的兔抗血清为香蕉线条病毒的高效特异性抗血清,效价高达1:51 200.
利用PCR方法從含香蕉線條病毒廣東分離物(BSV-GD)部分基因組的質粒中擴增該病毒的ORF Ⅰ基因,將其剋隆到pET-28b(+)原覈錶達載體中進行瞭融閤錶達.SDS-PAGE電泳髮現,目的融閤蛋白與預期大小一緻,相對分子質量約為23 000,錶達產物主要以不可溶的包涵體形式存在,將其變性溶解後利用N耑的組氨痠標籤進行純化.以純化產物為抗原免疫兔子製備瞭香蕉線條病毒的暘性兔抗血清,Western blot和ELISA分析錶明,製備的兔抗血清為香蕉線條病毒的高效特異性抗血清,效價高達1:51 200.
이용PCR방법종함향초선조병독엄동분리물(BSV-GD)부분기인조적질립중확증해병독적ORF Ⅰ기인,장기극륭도pET-28b(+)원핵표체재체중진행료융합표체.SDS-PAGE전영발현,목적융합단백여예기대소일치,상대분자질량약위23 000,표체산물주요이불가용적포함체형식존재,장기변성용해후이용N단적조안산표첨진행순화.이순화산물위항원면역토자제비료향초선조병독적양성토항혈청,Western blot화ELISA분석표명,제비적토항혈청위향초선조병독적고효특이성항혈청,효개고체1:51 200.
