南京师大学报（自然科学版）
南京師大學報（自然科學版）
남경사대학보（자연과학판）
JOURNAL OF NANJING NORMAL UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE EDITION)
2010年
3期
85-90
,共6页
王期%抗晶晶%忻寅强%李桂兰%殷志敏
王期%抗晶晶%忻寅彊%李桂蘭%慇誌敏
왕기%항정정%흔인강%리계란%은지민
谷氨酸脱氢酶(GAD)%工程菌%酶法合成%γ-氨基丁酸(GABA)
穀氨痠脫氫酶(GAD)%工程菌%酶法閤成%γ-氨基丁痠(GABA)
곡안산탈경매(GAD)%공정균%매법합성%γ-안기정산(GABA)
成功构建了一个高效表达大肠杆菌谷氨酸脱羧酶GAD来源的重组质粒pET28a-gadA,并转化E.coli BL21(DE3),工程菌株经0.4mmol/L IPTG或1g/L的乳糖, 37℃诱导表达8h,粗酶液的酶活达到12U/mL,大约是出发菌株E.coli K-12的60倍.工程菌1.15U粗酶液以31g/L L-谷氨酸钠为底物, 37℃、pH 4.0条件下反应4h,γ-氨基丁酸的生成量达到19.57g/L, L-谷氨酸钠的转化率为93%,从而为γ-氨基丁酸的生产提供了很好的前景.
成功構建瞭一箇高效錶達大腸桿菌穀氨痠脫羧酶GAD來源的重組質粒pET28a-gadA,併轉化E.coli BL21(DE3),工程菌株經0.4mmol/L IPTG或1g/L的乳糖, 37℃誘導錶達8h,粗酶液的酶活達到12U/mL,大約是齣髮菌株E.coli K-12的60倍.工程菌1.15U粗酶液以31g/L L-穀氨痠鈉為底物, 37℃、pH 4.0條件下反應4h,γ-氨基丁痠的生成量達到19.57g/L, L-穀氨痠鈉的轉化率為93%,從而為γ-氨基丁痠的生產提供瞭很好的前景.
성공구건료일개고효표체대장간균곡안산탈최매GAD래원적중조질립pET28a-gadA,병전화E.coli BL21(DE3),공정균주경0.4mmol/L IPTG혹1g/L적유당, 37℃유도표체8h,조매액적매활체도12U/mL,대약시출발균주E.coli K-12적60배.공정균1.15U조매액이31g/L L-곡안산납위저물, 37℃、pH 4.0조건하반응4h,γ-안기정산적생성량체도19.57g/L, L-곡안산납적전화솔위93%,종이위γ-안기정산적생산제공료흔호적전경.
