生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2011年
2期
45-47
,共3页
蔡刘体%胡重怡%张永春%韩晓红
蔡劉體%鬍重怡%張永春%韓曉紅
채류체%호중이%장영춘%한효홍
烤烟%基因%均一化%cDNA文库%表达序列标签
烤煙%基因%均一化%cDNA文庫%錶達序列標籤
고연%기인%균일화%cDNA문고%표체서렬표첨
目的:为了获得功能基因的信息,构建烤烟品种南江3号的均一化cDNA文库.方法:用RNeasy Plant Mini Kit提取烤烟南江3号叶片和花的RNA,用反转录酶逆转录合成第一链eDNA.以LD-PCR扩增获得的双链cDNA为模板,采用基于双链特异性核酸酶(Duplex-Specific Nuclease,DSN)的均一化cDNA文库技术,构建南江3号盛花期的均一化cDNA文库.结果:构建了南江3号盛花期的均一化cDNA文库,文库重组率大为97.47%,库容量约为1.26×10<'6>,插入片段平均长度大于1.2kb.从文库中随机48个克隆进行PCR检测,挑取20个克隆进行测序,序列通过BLAST比对结果显示文库可能包含大量基因和ESTs序列.结论:该文库为研究南江3号的基因功能和资源提供材料来源.
目的:為瞭穫得功能基因的信息,構建烤煙品種南江3號的均一化cDNA文庫.方法:用RNeasy Plant Mini Kit提取烤煙南江3號葉片和花的RNA,用反轉錄酶逆轉錄閤成第一鏈eDNA.以LD-PCR擴增穫得的雙鏈cDNA為模闆,採用基于雙鏈特異性覈痠酶(Duplex-Specific Nuclease,DSN)的均一化cDNA文庫技術,構建南江3號盛花期的均一化cDNA文庫.結果:構建瞭南江3號盛花期的均一化cDNA文庫,文庫重組率大為97.47%,庫容量約為1.26×10<'6>,插入片段平均長度大于1.2kb.從文庫中隨機48箇剋隆進行PCR檢測,挑取20箇剋隆進行測序,序列通過BLAST比對結果顯示文庫可能包含大量基因和ESTs序列.結論:該文庫為研究南江3號的基因功能和資源提供材料來源.
목적:위료획득공능기인적신식,구건고연품충남강3호적균일화cDNA문고.방법:용RNeasy Plant Mini Kit제취고연남강3호협편화화적RNA,용반전록매역전록합성제일련eDNA.이LD-PCR확증획득적쌍련cDNA위모판,채용기우쌍련특이성핵산매(Duplex-Specific Nuclease,DSN)적균일화cDNA문고기술,구건남강3호성화기적균일화cDNA문고.결과:구건료남강3호성화기적균일화cDNA문고,문고중조솔대위97.47%,고용량약위1.26×10<'6>,삽입편단평균장도대우1.2kb.종문고중수궤48개극륭진행PCR검측,도취20개극륭진행측서,서렬통과BLAST비대결과현시문고가능포함대량기인화ESTs서렬.결론:해문고위연구남강3호적기인공능화자원제공재료래원.
