粮食储藏
糧食儲藏
양식저장
GRAIN STORAGE
2011年
2期
34-37
,共4页
谷蠹%PAPD优化%反应体系和程序%正交组合%单因素
穀蠹%PAPD優化%反應體繫和程序%正交組閤%單因素
곡두%PAPD우화%반응체계화정서%정교조합%단인소
以谷蠹为研究对象,采用L16(45)正交组合实验和单因素梯度实验对MgCl2、dNTP、随机引物、Taq酶、模板DNA浓度和退火温度、循环次数等影响RAPD扩增的重要因素进行优化,以期建立最优的RAPD反应体系与程序.实验结果表明:各因素最适条件为:25μL PCR反应体系中,10×Buffer 2.5μL,MgCl2 2.5 mmol/L,dNTP0.4 mmol/L,随机引物960 pmol/L,Taq酶0.5 U,模板DNA 20ng;退火温度为37℃,循环次数为45次.在对谷蠹进行RAPD分析时,采用优化的反应条件,规范实验操作,使用同厂家同批次的试剂,实验结果就会具有很好的重复性和稳定性.
以穀蠹為研究對象,採用L16(45)正交組閤實驗和單因素梯度實驗對MgCl2、dNTP、隨機引物、Taq酶、模闆DNA濃度和退火溫度、循環次數等影響RAPD擴增的重要因素進行優化,以期建立最優的RAPD反應體繫與程序.實驗結果錶明:各因素最適條件為:25μL PCR反應體繫中,10×Buffer 2.5μL,MgCl2 2.5 mmol/L,dNTP0.4 mmol/L,隨機引物960 pmol/L,Taq酶0.5 U,模闆DNA 20ng;退火溫度為37℃,循環次數為45次.在對穀蠹進行RAPD分析時,採用優化的反應條件,規範實驗操作,使用同廠傢同批次的試劑,實驗結果就會具有很好的重複性和穩定性.
이곡두위연구대상,채용L16(45)정교조합실험화단인소제도실험대MgCl2、dNTP、수궤인물、Taq매、모판DNA농도화퇴화온도、순배차수등영향RAPD확증적중요인소진행우화,이기건립최우적RAPD반응체계여정서.실험결과표명:각인소최괄조건위:25μL PCR반응체계중,10×Buffer 2.5μL,MgCl2 2.5 mmol/L,dNTP0.4 mmol/L,수궤인물960 pmol/L,Taq매0.5 U,모판DNA 20ng;퇴화온도위37℃,순배차수위45차.재대곡두진행RAPD분석시,채용우화적반응조건,규범실험조작,사용동엄가동비차적시제,실험결과취회구유흔호적중복성화은정성.
