激光杂志
激光雜誌
격광잡지
LASER JOURNAL
2011年
3期
68-70
,共3页
莫显刚%陈庆伟%李兴升%蒋金
莫顯剛%陳慶偉%李興升%蔣金
막현강%진경위%리흥승%장금
人脐静脉内皮细胞%钠氧交换体-1%小干扰RNA%血管内皮生长因子%血管生成
人臍靜脈內皮細胞%鈉氧交換體-1%小榦擾RNA%血管內皮生長因子%血管生成
인제정맥내피세포%납양교환체-1%소간우RNA%혈관내피생장인자%혈관생성
目的:本文探讨用小干扰RNA(siRNA)抑制钠氧交换体-1(NHEI)能否抑制血管内皮生长因子(VEGF)诱导的体外血管生成.方法:用阳离子脂质体方法将靶向抑制NHEI的小分子RNA(NHEI siRNA)及阴性对照的寡核苷酸片段(NHE1 siNC)转染到人脐静脉内皮细胞(HUVECs),荧光显微照相检测转染效率,RT-PCT及Westem blot检测转染48h后mRNA的蛋白及NHE1的表达水平,BCECF/AM法检测细胞内pH(phi)反映NHE1活性,进而转染后检测细胞总数及死亡细胞数量改变,Transwell法检测VEGF诱导HUVECs迁移能力及Matrigel小管形成的影响.结果:转染效率在95%以上.转染48h,NHE1 siRNA转染组与NHE1 siNC转染组比较,在mRNA及蛋白水平表达分别减低90.82%,与74.42%(P<0.05,P<0.01).细胞内pH值降低(7.224±0.231vs 7.405±0.163;P<0.05).NHE1 siRNA组细胞总数较NHE1 siNC组少,而细胞死亡比例增加.相对NHE1 siNC,NHE1 siRNA抑制细胞迁移为33.14%及抑制Matrigel小管形成达29.47%.结论:抑制NHE1表达和活性可能抑制VEGF诱导血管生成,NHE1可能是控制各种病理的血管生成的潜在靶点.
目的:本文探討用小榦擾RNA(siRNA)抑製鈉氧交換體-1(NHEI)能否抑製血管內皮生長因子(VEGF)誘導的體外血管生成.方法:用暘離子脂質體方法將靶嚮抑製NHEI的小分子RNA(NHEI siRNA)及陰性對照的寡覈苷痠片段(NHE1 siNC)轉染到人臍靜脈內皮細胞(HUVECs),熒光顯微照相檢測轉染效率,RT-PCT及Westem blot檢測轉染48h後mRNA的蛋白及NHE1的錶達水平,BCECF/AM法檢測細胞內pH(phi)反映NHE1活性,進而轉染後檢測細胞總數及死亡細胞數量改變,Transwell法檢測VEGF誘導HUVECs遷移能力及Matrigel小管形成的影響.結果:轉染效率在95%以上.轉染48h,NHE1 siRNA轉染組與NHE1 siNC轉染組比較,在mRNA及蛋白水平錶達分彆減低90.82%,與74.42%(P<0.05,P<0.01).細胞內pH值降低(7.224±0.231vs 7.405±0.163;P<0.05).NHE1 siRNA組細胞總數較NHE1 siNC組少,而細胞死亡比例增加.相對NHE1 siNC,NHE1 siRNA抑製細胞遷移為33.14%及抑製Matrigel小管形成達29.47%.結論:抑製NHE1錶達和活性可能抑製VEGF誘導血管生成,NHE1可能是控製各種病理的血管生成的潛在靶點.
목적:본문탐토용소간우RNA(siRNA)억제납양교환체-1(NHEI)능부억제혈관내피생장인자(VEGF)유도적체외혈관생성.방법:용양리자지질체방법장파향억제NHEI적소분자RNA(NHEI siRNA)급음성대조적과핵감산편단(NHE1 siNC)전염도인제정맥내피세포(HUVECs),형광현미조상검측전염효솔,RT-PCT급Westem blot검측전염48h후mRNA적단백급NHE1적표체수평,BCECF/AM법검측세포내pH(phi)반영NHE1활성,진이전염후검측세포총수급사망세포수량개변,Transwell법검측VEGF유도HUVECs천이능력급Matrigel소관형성적영향.결과:전염효솔재95%이상.전염48h,NHE1 siRNA전염조여NHE1 siNC전염조비교,재mRNA급단백수평표체분별감저90.82%,여74.42%(P<0.05,P<0.01).세포내pH치강저(7.224±0.231vs 7.405±0.163;P<0.05).NHE1 siRNA조세포총수교NHE1 siNC조소,이세포사망비례증가.상대NHE1 siNC,NHE1 siRNA억제세포천이위33.14%급억제Matrigel소관형성체29.47%.결론:억제NHE1표체화활성가능억제VEGF유도혈관생성,NHE1가능시공제각충병리적혈관생성적잠재파점.
