中国海洋大学学报（自然科学版）
中國海洋大學學報（自然科學版）
중국해양대학학보（자연과학판）
PERIODICAL OF OCEAN UNIVERSITY OF CHINA
2012年
5期
55-59
,共5页
淋巴囊肿病毒%牙鲆鳃细胞%组织细胞培养半数感染量%免疫细胞化学法
淋巴囊腫病毒%牙鲆鰓細胞%組織細胞培養半數感染量%免疫細胞化學法
림파낭종병독%아평새세포%조직세포배양반수감염량%면역세포화학법
利用免疫细胞化学法测定鱼类淋巴囊肿病毒(LCDV)滴度.以牙鲆鳃细胞系(FG)作为感染细胞,将生长旺盛的FG细胞接种于48孔培养板中培养至形成细胞单层,用2倍连续稀释的LCDV粗提液分别接种FG细胞.固定各稀释度LCDV感染后的FG细胞,孵育抗牙鲆LCDV单克隆抗体,其后再运用生物素-亲合素反应系统,以碱性磷酸酶底物APRed试剂盒发色.倒置显微镜观察,被病毒感染的FG细胞的细胞质呈现红色,未被感染细胞的细胞质呈无色.记录各稀释度病毒感染的阳性细胞孔数,按Reed-Muench法计算组织细胞培养半数感染量(TCID0).结果显示,免疫细胞化学法测得LCDV在FG的滴度为1.77×210 TCID50/mL.该法可以用来有效测定LCDV滴度,且结果直观、准确性较好,灵敏度较高.
利用免疫細胞化學法測定魚類淋巴囊腫病毒(LCDV)滴度.以牙鲆鰓細胞繫(FG)作為感染細胞,將生長旺盛的FG細胞接種于48孔培養闆中培養至形成細胞單層,用2倍連續稀釋的LCDV粗提液分彆接種FG細胞.固定各稀釋度LCDV感染後的FG細胞,孵育抗牙鲆LCDV單剋隆抗體,其後再運用生物素-親閤素反應繫統,以堿性燐痠酶底物APRed試劑盒髮色.倒置顯微鏡觀察,被病毒感染的FG細胞的細胞質呈現紅色,未被感染細胞的細胞質呈無色.記錄各稀釋度病毒感染的暘性細胞孔數,按Reed-Muench法計算組織細胞培養半數感染量(TCID0).結果顯示,免疫細胞化學法測得LCDV在FG的滴度為1.77×210 TCID50/mL.該法可以用來有效測定LCDV滴度,且結果直觀、準確性較好,靈敏度較高.
이용면역세포화학법측정어류림파낭종병독(LCDV)적도.이아평새세포계(FG)작위감염세포,장생장왕성적FG세포접충우48공배양판중배양지형성세포단층,용2배련속희석적LCDV조제액분별접충FG세포.고정각희석도LCDV감염후적FG세포,부육항아평LCDV단극륭항체,기후재운용생물소-친합소반응계통,이감성린산매저물APRed시제합발색.도치현미경관찰,피병독감염적FG세포적세포질정현홍색,미피감염세포적세포질정무색.기록각희석도병독감염적양성세포공수,안Reed-Muench법계산조직세포배양반수감염량(TCID0).결과현시,면역세포화학법측득LCDV재FG적적도위1.77×210 TCID50/mL.해법가이용래유효측정LCDV적도,차결과직관、준학성교호,령민도교고.
