中华口腔医学杂志
中華口腔醫學雜誌
중화구강의학잡지
Chinese Journal of Stomatology
2006年
7期
403-406
,共4页
刘习强%黄洪章%潘朝斌%王方金%张彬%梁蔚文
劉習彊%黃洪章%潘朝斌%王方金%張彬%樑蔚文
류습강%황홍장%반조빈%왕방금%장빈%량위문
癌,鳞状细胞%RNA%基因治疗
癌,鱗狀細胞%RNA%基因治療
암,린상세포%RNA%기인치료
目的探讨靶向小干扰RNA表达框架(SEC)对舌癌细胞内源性人端粒酶逆转录酶基因(hTERT)的特异性抑制作用.方法利用两步法PCR技术构建多条SEC,采用第5代聚酰胺-胺型树枝状高聚物(G5 PAMAM-D)纳米微球介导SEC转染Tca8113细胞,应用实时荧光定量RT-PCR技术和Western-blot等检测内源性hTERT的表达水平,并进一步筛选出最有效的小干扰RNA靶序列.结果针对不同靶位点设计的SEC干扰效果有显著差异,SEC-A的干扰效果最强,并且能以高度序列特异性方式沉默hTERT基因的表达;此外,转染次数与载体理化特性亦可影响SEC的干扰效应(P＜0.05).结论RNA干扰效应主要取决于靶序列;G5 PAMAM-D纳米载体能够介导SEC-A高效抑制内源性hTERT基因的表达;hTERT基因有望成为舌癌基因治疗的理想靶点.
目的探討靶嚮小榦擾RNA錶達框架(SEC)對舌癌細胞內源性人耑粒酶逆轉錄酶基因(hTERT)的特異性抑製作用.方法利用兩步法PCR技術構建多條SEC,採用第5代聚酰胺-胺型樹枝狀高聚物(G5 PAMAM-D)納米微毬介導SEC轉染Tca8113細胞,應用實時熒光定量RT-PCR技術和Western-blot等檢測內源性hTERT的錶達水平,併進一步篩選齣最有效的小榦擾RNA靶序列.結果針對不同靶位點設計的SEC榦擾效果有顯著差異,SEC-A的榦擾效果最彊,併且能以高度序列特異性方式沉默hTERT基因的錶達;此外,轉染次數與載體理化特性亦可影響SEC的榦擾效應(P＜0.05).結論RNA榦擾效應主要取決于靶序列;G5 PAMAM-D納米載體能夠介導SEC-A高效抑製內源性hTERT基因的錶達;hTERT基因有望成為舌癌基因治療的理想靶點.
목적탐토파향소간우RNA표체광가(SEC)대설암세포내원성인단립매역전록매기인(hTERT)적특이성억제작용.방법이용량보법PCR기술구건다조SEC,채용제5대취선알-알형수지상고취물(G5 PAMAM-D)납미미구개도SEC전염Tca8113세포,응용실시형광정량RT-PCR기술화Western-blot등검측내원성hTERT적표체수평,병진일보사선출최유효적소간우RNA파서렬.결과침대불동파위점설계적SEC간우효과유현저차이,SEC-A적간우효과최강,병차능이고도서렬특이성방식침묵hTERT기인적표체;차외,전염차수여재체이화특성역가영향SEC적간우효응(P＜0.05).결론RNA간우효응주요취결우파서렬;G5 PAMAM-D납미재체능구개도SEC-A고효억제내원성hTERT기인적표체;hTERT기인유망성위설암기인치료적이상파점.
