色谱
色譜
색보
CHINESE JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY
2004年
5期
543-546
,共4页
王宾香%时祥柱%郭春腾%叶秀云%王中来%饶平凡
王賓香%時祥柱%郭春騰%葉秀雲%王中來%饒平凡
왕빈향%시상주%곽춘등%협수운%왕중래%요평범
阴离子交换色谱%阳离子交换色谱%串联色谱%苦瓜籽%纯化%核糖体失活蛋白
陰離子交換色譜%暘離子交換色譜%串聯色譜%苦瓜籽%純化%覈糖體失活蛋白
음리자교환색보%양리자교환색보%천련색보%고과자%순화%핵당체실활단백
将阴阳离子交换色谱柱在灌注色谱工作站上串联,使苦瓜籽粗提液中未被阴离子色谱柱吸附的蛋白质直接在阳离子色谱柱上吸附,用盐线性梯度洗脱从阳离子色谱柱上分离出两个具有抗真菌活性的蛋白.两个抗真菌蛋白经鉴定都达到了电泳纯,相对分子质量均为30 000左右,N-端氨基酸序列分别为DVSFRLSGADPRSYGMFI与DVNFDLSTATAK,表明所得到的两种蛋白为苦瓜籽中的2个Ⅰ型核糖体失活蛋白α-苦瓜素(α-MMC) 和β-苦瓜素(β-MMC).抗菌实验表明,α-MMC对香蕉枯萎菌和果腐霉菌均具有较强的抑制作用,β-MMC对果腐霉菌有较强的抑制作用,而α-MMC和β-MMC对白绢菌的抑制活性均不明显.采用串联色谱,α-MMC和β-MMC的质量回收率分别为13.8%和8.0%.
將陰暘離子交換色譜柱在灌註色譜工作站上串聯,使苦瓜籽粗提液中未被陰離子色譜柱吸附的蛋白質直接在暘離子色譜柱上吸附,用鹽線性梯度洗脫從暘離子色譜柱上分離齣兩箇具有抗真菌活性的蛋白.兩箇抗真菌蛋白經鑒定都達到瞭電泳純,相對分子質量均為30 000左右,N-耑氨基痠序列分彆為DVSFRLSGADPRSYGMFI與DVNFDLSTATAK,錶明所得到的兩種蛋白為苦瓜籽中的2箇Ⅰ型覈糖體失活蛋白α-苦瓜素(α-MMC) 和β-苦瓜素(β-MMC).抗菌實驗錶明,α-MMC對香蕉枯萎菌和果腐黴菌均具有較彊的抑製作用,β-MMC對果腐黴菌有較彊的抑製作用,而α-MMC和β-MMC對白絹菌的抑製活性均不明顯.採用串聯色譜,α-MMC和β-MMC的質量迴收率分彆為13.8%和8.0%.
장음양리자교환색보주재관주색보공작참상천련,사고과자조제액중미피음리자색보주흡부적단백질직접재양리자색보주상흡부,용염선성제도세탈종양리자색보주상분리출량개구유항진균활성적단백.량개항진균단백경감정도체도료전영순,상대분자질량균위30 000좌우,N-단안기산서렬분별위DVSFRLSGADPRSYGMFI여DVNFDLSTATAK,표명소득도적량충단백위고과자중적2개Ⅰ형핵당체실활단백α-고과소(α-MMC) 화β-고과소(β-MMC).항균실험표명,α-MMC대향초고위균화과부매균균구유교강적억제작용,β-MMC대과부매균유교강적억제작용,이α-MMC화β-MMC대백견균적억제활성균불명현.채용천련색보,α-MMC화β-MMC적질량회수솔분별위13.8%화8.0%.
