CAJ | 학술논문

将烟草天蛾Manducasexta几丁质酶基因克隆入融合表达载体pET-28a,并在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中进行诱导表达.表达菌株经0.5 mmol/L IPTG诱导6～8 h后,几丁质酶表达并形成包涵体.在Ni2+-NTA亲和柱上经变、复性和纯化,得到可溶的几丁质酶.表达产物经Western印迹鉴定.采用切胶回收的方法切割回收包涵体,并将回收产物免疫新西兰大白兔,ELISA检测抗体效价达1:20 000.Western印迹检测证明抗体特异性良好.
장연초천아Manducasexta궤정질매기인극륭입융합표체재체pET-28a,병재대장간균E.coli BL21(DE3)중진행유도표체.표체균주경0.5 mmol/L IPTG유도6～8 h후,궤정질매표체병형성포함체.재Ni2+-NTA친화주상경변、복성화순화,득도가용적궤정질매.표체산물경Western인적감정.채용절효회수적방법절할회수포함체,병장회수산물면역신서란대백토,ELISA검측항체효개체1:20 000.Western인적검측증명항체특이성량호.