武汉植物学研究
武漢植物學研究
무한식물학연구
JOURNAL OF WUHAN BOTANICAL RESEARCH
2006年
4期
292-297
,共6页
邵群%韩宁%丁同楼%王宝山
邵群%韓寧%丁同樓%王寶山
소군%한저%정동루%왕보산
SsHKT1基因%多克隆抗体%盐胁迫%K+营养
SsHKT1基因%多剋隆抗體%鹽脅迫%K+營養
SsHKT1기인%다극륭항체%염협박%K+영양
利用RT-PCR及RACE技术从盐生植物盐地碱蓬(Suaeda salsa L.)根中克隆了高亲和K+转运载体SsHKT1的基因.以SsHKT1基因的cDNA为模板,扩增了cDNA中的亲水片段(403～612 bp),连接至原核表达载体pGEX-6P-3中并转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达了融合蛋白.该蛋白主要以包涵体的形式存在,纯化后免疫新西兰兔,得到了特异性较高的SsHKT1多克隆抗体.利用此抗体进行了Western blot分析,表明SsHKT1可能主要存在于质膜上.进一步研究了K+饥饿及盐胁迫条件下SsHKT1蛋白表达量的变化,结果表明K+饥饿及盐胁迫条件下SsHKT1的表达量都明显增加,表明SsHKT1在盐地碱蓬K+吸收特别是高盐条件下K+营养中有重要作用.
利用RT-PCR及RACE技術從鹽生植物鹽地堿蓬(Suaeda salsa L.)根中剋隆瞭高親和K+轉運載體SsHKT1的基因.以SsHKT1基因的cDNA為模闆,擴增瞭cDNA中的親水片段(403～612 bp),連接至原覈錶達載體pGEX-6P-3中併轉化大腸桿菌BL21(DE3),IPTG誘導錶達瞭融閤蛋白.該蛋白主要以包涵體的形式存在,純化後免疫新西蘭兔,得到瞭特異性較高的SsHKT1多剋隆抗體.利用此抗體進行瞭Western blot分析,錶明SsHKT1可能主要存在于質膜上.進一步研究瞭K+饑餓及鹽脅迫條件下SsHKT1蛋白錶達量的變化,結果錶明K+饑餓及鹽脅迫條件下SsHKT1的錶達量都明顯增加,錶明SsHKT1在鹽地堿蓬K+吸收特彆是高鹽條件下K+營養中有重要作用.
이용RT-PCR급RACE기술종염생식물염지감봉(Suaeda salsa L.)근중극륭료고친화K+전운재체SsHKT1적기인.이SsHKT1기인적cDNA위모판,확증료cDNA중적친수편단(403～612 bp),련접지원핵표체재체pGEX-6P-3중병전화대장간균BL21(DE3),IPTG유도표체료융합단백.해단백주요이포함체적형식존재,순화후면역신서란토,득도료특이성교고적SsHKT1다극륭항체.이용차항체진행료Western blot분석,표명SsHKT1가능주요존재우질막상.진일보연구료K+기아급염협박조건하SsHKT1단백표체량적변화,결과표명K+기아급염협박조건하SsHKT1적표체량도명현증가,표명SsHKT1재염지감봉K+흡수특별시고염조건하K+영양중유중요작용.
