CAJ | 학술논문

本研究比较经骨髓腔内输注(intra-bone marrow infusion,iBMI)及静脉输注(intravenous infusion,iⅥ)人脐血(cord blood,CB)造血干/祖细胞(HS/PC)对NOD-SCID受鼠体内造血重建的影响.将纯化的CB CD34+细胞移植到受亚致死剂量照射的NOD-SCID受鼠体内.受鼠随机分为3组:①iBMI组:骨髓腔内输注CD34+细胞5× 105/只;②iⅥ组:尾静脉输注CD34+细胞5×103/只;③阴性对照组:输注PBS缓冲液.于异种移植后第3、5及第8周通过流式细胞术、聚合酶链式反应、免疫组织化学及造血祖细胞集落分析的方法比较人造血系统各系细胞植入率,通过二次移植实验比较NOD-SCID受鼠体内人HS/PC长期造血重建能力.结果表明:移植后第8周,iB-MI组受鼠骨髓、外周血及脾脏中人CD455细胞比例均显著高于iⅥ组(P<0.05);iBMI组及iⅥ组移植的HS/PC均具有多向分化能力;移植后第8周,iBMI组受鼠骨髓中CD45+CD19+细胞、CD45+CD33+细胞、CD45+CD56+细胞及CD45+CD34+细胞比例均显著高于iⅥ组(P<0.05),CD45+CD14+细胞及CD45+CD41a+细胞比例亦高于iⅥ组(P>0.05).iⅥ组及iBMI组长期存活受鼠的肝脏、脾脏、肺脏、外周血、骨髓细胞中均可检测到人17号染色体α-卫星特异性片段.应用免疫组织化学法在移植后第8周的iBMI组受鼠的脾脏、肝脏和肺脏中均可检出人CD45抗原的表达.iBMI组受鼠的骨髓细胞各系集落总数于移植后第8周显著高于iⅥ组(P<0.05).二次移植后第6周,iⅥ组及iBMI组受鼠的各组织脏器中均可检出人17号染色体α-卫星特异性片段的表达.结论:与iⅥ相比,经iBMI移植人CB CD34+细胞至NOD-SCID受鼠可以促进HS/PC的造血重建及多向分化,提高植入率.
본연구비교경골수강내수주(intra-bone marrow infusion,iBMI)급정맥수주(intravenous infusion,iⅥ)인제혈(cord blood,CB)조혈간/조세포(HS/PC)대NOD-SCID수서체내조혈중건적영향.장순화적CB CD34+세포이식도수아치사제량조사적NOD-SCID수서체내.수서수궤분위3조:①iBMI조:골수강내수주CD34+세포5× 105/지;②iⅥ조:미정맥수주CD34+세포5×103/지;③음성대조조:수주PBS완충액.우이충이식후제3、5급제8주통과류식세포술、취합매련식반응、면역조직화학급조혈조세포집락분석적방법비교인조혈계통각계세포식입솔,통과이차이식실험비교NOD-SCID수서체내인HS/PC장기조혈중건능력.결과표명:이식후제8주,iB-MI조수서골수、외주혈급비장중인CD455세포비례균현저고우iⅥ조(P<0.05);iBMI조급iⅥ조이식적HS/PC균구유다향분화능력;이식후제8주,iBMI조수서골수중CD45+CD19+세포、CD45+CD33+세포、CD45+CD56+세포급CD45+CD34+세포비례균현저고우iⅥ조(P<0.05),CD45+CD14+세포급CD45+CD41a+세포비례역고우iⅥ조(P>0.05).iⅥ조급iBMI조장기존활수서적간장、비장、폐장、외주혈、골수세포중균가검측도인17호염색체α-위성특이성편단.응용면역조직화학법재이식후제8주적iBMI조수서적비장、간장화폐장중균가검출인CD45항원적표체.iBMI조수서적골수세포각계집락총수우이식후제8주현저고우iⅥ조(P<0.05).이차이식후제6주,iⅥ조급iBMI조수서적각조직장기중균가검출인17호염색체α-위성특이성편단적표체.결론:여iⅥ상비,경iBMI이식인CB CD34+세포지NOD-SCID수서가이촉진HS/PC적조혈중건급다향분화,제고식입솔.