生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2009年
5期
605-608,618
,共5页
尹肖云%孟元光%杨洁%伍志强%赵亚力%韩为东
尹肖雲%孟元光%楊潔%伍誌彊%趙亞力%韓為東
윤초운%맹원광%양길%오지강%조아력%한위동
蛋白相互作用%白血病相关蛋白16%角蛋白18%免疫共沉淀%pull down
蛋白相互作用%白血病相關蛋白16%角蛋白18%免疫共沉澱%pull down
단백상호작용%백혈병상관단백16%각단백18%면역공침정%pull down
目的:验证白血病相关蛋白(LRP)16与角蛋白(KRT)家族成员KRT18之间的相互作用关系.方法:PCR扩增KRT18及其结构域缺失体基因片段,构建KRT18全长及其结构域真核表达载体,通过体外GST pull down实验和体内免疫共沉淀实验验证LRP16/KRT18的相互作用,并鉴定其作用的结构域.结果:构建了KRT18及其结构域重组子,GST pulldown实验证明LRP16与KRT18在体外存在相互作用,它们的特异结合区域位于KRT18的C端,KRT18能够与LRP16的C端结构域相互作用;免疫共沉淀实验表明内源性LRP16与KRT18的C端在体内存在特异结合.结论:KRT18与LRP16存在相互作用,为进一步研究KRT18影响LRP16的亚细胞分布及调控LRP16核功能执行的作用机制奠定了基础.
目的:驗證白血病相關蛋白(LRP)16與角蛋白(KRT)傢族成員KRT18之間的相互作用關繫.方法:PCR擴增KRT18及其結構域缺失體基因片段,構建KRT18全長及其結構域真覈錶達載體,通過體外GST pull down實驗和體內免疫共沉澱實驗驗證LRP16/KRT18的相互作用,併鑒定其作用的結構域.結果:構建瞭KRT18及其結構域重組子,GST pulldown實驗證明LRP16與KRT18在體外存在相互作用,它們的特異結閤區域位于KRT18的C耑,KRT18能夠與LRP16的C耑結構域相互作用;免疫共沉澱實驗錶明內源性LRP16與KRT18的C耑在體內存在特異結閤.結論:KRT18與LRP16存在相互作用,為進一步研究KRT18影響LRP16的亞細胞分佈及調控LRP16覈功能執行的作用機製奠定瞭基礎.
목적:험증백혈병상관단백(LRP)16여각단백(KRT)가족성원KRT18지간적상호작용관계.방법:PCR확증KRT18급기결구역결실체기인편단,구건KRT18전장급기결구역진핵표체재체,통과체외GST pull down실험화체내면역공침정실험험증LRP16/KRT18적상호작용,병감정기작용적결구역.결과:구건료KRT18급기결구역중조자,GST pulldown실험증명LRP16여KRT18재체외존재상호작용,타문적특이결합구역위우KRT18적C단,KRT18능구여LRP16적C단결구역상호작용;면역공침정실험표명내원성LRP16여KRT18적C단재체내존재특이결합.결론:KRT18여LRP16존재상호작용,위진일보연구KRT18영향LRP16적아세포분포급조공LRP16핵공능집행적작용궤제전정료기출.
