CAJ | 학술논문

本研究旨在通过对根癌农杆菌侵染洋葱表皮细胞的条件进行优化,从而建立一种新的瞬时表达系统,并将其应用于玉米In5-2启动子的功能区域的分析中,明确In5-2启动子的乙酰苯胺类化合物诱导元件的具体位置.在本研究中采用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)侵染洋葱(Allium cepa)表皮细胞,对转β-葡糖醛酸酶(GUS)基因的瞬时表达进行研究,并分析了侵染液中乙酰丁香酮(As)的浓度、侵染时间、菌液浓度、共培养时间对GUS基因的瞬间表达的影响.结果显示,在OD600值为0.8的农杆菌液中感染15 min,共培养3 d,能够得到较高的GUS基因瞬间表达,从而建立了一种新的瞬间表达系统.同时,构建了含不同长度的玉米(Zea mays)In5-2启动子片段缺失载体,利用新的瞬时表达系统分析其功能区域,推测出乙酰苯胺类化合物诱导元件位于ATG上游-220～-143 bp之间.结果表明新的瞬时表达系统可以快速有效地进行启动子的分析.
본연구지재통과대근암농간균침염양총표피세포적조건진행우화,종이건립일충신적순시표체계통,병장기응용우옥미In5-2계동자적공능구역적분석중,명학In5-2계동자적을선분알류화합물유도원건적구체위치.재본연구중채용근암농간균(Agrobacterium tumefaciens)침염양총(Allium cepa)표피세포,대전β-포당철산매(GUS)기인적순시표체진행연구,병분석료침염액중을선정향동(As)적농도、침염시간、균액농도、공배양시간대GUS기인적순간표체적영향.결과현시,재OD600치위0.8적농간균액중감염15 min,공배양3 d,능구득도교고적GUS기인순간표체,종이건립료일충신적순간표체계통.동시,구건료함불동장도적옥미(Zea mays)In5-2계동자편단결실재체,이용신적순시표체계통분석기공능구역,추측출을선분알류화합물유도원건위우ATG상유-220～-143 bp지간.결과표명신적순시표체계통가이쾌속유효지진행계동자적분석.