肠外与肠内营养
腸外與腸內營養
장외여장내영양
PARENTERAL & ENTERAL NUTRITION
2012年
2期
95-98
,共4页
黄传江%黄骞%罗冰%吴性江%李宁
黃傳江%黃鶱%囉冰%吳性江%李寧
황전강%황건%라빙%오성강%리저
左旋精氨酸%氨基酸转运体-2%靶向小分子干扰RNA
左鏇精氨痠%氨基痠轉運體-2%靶嚮小分子榦擾RNA
좌선정안산%안기산전운체-2%파향소분자간우RNA
目的:构建氨基酸转运体-2(CAT-2)的靶向小分子干扰RNA (siRNA)表达载体质粒,并测序鉴定,为下一步研究靶向siRNA对CAT-2蛋白表达和L-argine/iNOS/NO通路的影响建立基础. 方法:根据L-精氨酸转运体CAT-2的mRNA序列及siRNA设计原则,并经BLAST比对,设计合成4对siRNA寡聚单链DNA,退火成双链dsDNA,用载体构建试剂盒BLOCK-iTTM Pol II miR RNAi Expression Vector Kit with EmGFP进行重组质粒构建,将4对dsDNA分别插入到siRNA表达载体pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR中,构建4个siRNA表达质粒,并转化至感受态细菌DH5.筛选阳性克隆并提取重组质粒后测序分析. 结果:CAT-2的siRNA重组载体质粒测序结果证实表达载体构建成功. 结论:L-精氨酸转运体CAT-2 siRNA表达载体质粒成功构建,为下一步研究靶向siRNA对CAT-2蛋白表达和L-arg/iNOS/NO通路的影响建立基础.
目的:構建氨基痠轉運體-2(CAT-2)的靶嚮小分子榦擾RNA (siRNA)錶達載體質粒,併測序鑒定,為下一步研究靶嚮siRNA對CAT-2蛋白錶達和L-argine/iNOS/NO通路的影響建立基礎. 方法:根據L-精氨痠轉運體CAT-2的mRNA序列及siRNA設計原則,併經BLAST比對,設計閤成4對siRNA寡聚單鏈DNA,退火成雙鏈dsDNA,用載體構建試劑盒BLOCK-iTTM Pol II miR RNAi Expression Vector Kit with EmGFP進行重組質粒構建,將4對dsDNA分彆插入到siRNA錶達載體pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR中,構建4箇siRNA錶達質粒,併轉化至感受態細菌DH5.篩選暘性剋隆併提取重組質粒後測序分析. 結果:CAT-2的siRNA重組載體質粒測序結果證實錶達載體構建成功. 結論:L-精氨痠轉運體CAT-2 siRNA錶達載體質粒成功構建,為下一步研究靶嚮siRNA對CAT-2蛋白錶達和L-arg/iNOS/NO通路的影響建立基礎.
목적:구건안기산전운체-2(CAT-2)적파향소분자간우RNA (siRNA)표체재체질립,병측서감정,위하일보연구파향siRNA대CAT-2단백표체화L-argine/iNOS/NO통로적영향건립기출. 방법:근거L-정안산전운체CAT-2적mRNA서렬급siRNA설계원칙,병경BLAST비대,설계합성4대siRNA과취단련DNA,퇴화성쌍련dsDNA,용재체구건시제합BLOCK-iTTM Pol II miR RNAi Expression Vector Kit with EmGFP진행중조질립구건,장4대dsDNA분별삽입도siRNA표체재체pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR중,구건4개siRNA표체질립,병전화지감수태세균DH5.사선양성극륭병제취중조질립후측서분석. 결과:CAT-2적siRNA중조재체질립측서결과증실표체재체구건성공. 결론:L-정안산전운체CAT-2 siRNA표체재체질립성공구건,위하일보연구파향siRNA대CAT-2단백표체화L-arg/iNOS/NO통로적영향건립기출.
