青岛农业大学学报(自然科学版)
青島農業大學學報(自然科學版)
청도농업대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF QINGDAO AGRICULTURAL UNIVERSITY
2012年
2期
84-88
,共5页
脂肪组织特异表达载体%增强子%启动子%ap2
脂肪組織特異錶達載體%增彊子%啟動子%ap2
지방조직특이표체재체%증강자%계동자%ap2
采用PCR技术克隆了小鼠脂肪组织特异表达的脂肪酸结合蛋白ap2基因增强子和启动子,通过DNA重组技术将该基因增强子和启动子重组于pEGFP - N1真核表达载体上,构建pEGFP - N1 - ap2重组质粒,通过PCR扩增、酶切电泳分析和测序的方法对重组质粒进行鉴定,并转染小鼠前脂肪细胞,通过荧光素酶活性检测特异性表达强度.结果表明,本实验克隆的ap2基因增强子和启动子的碱基组成与GenBank中的ap2基因序列完全一致,通过DNA重组技术将该基因增强子和启动子重组于pEGFP- N1真核表达载体上,成功构建了脂肪组织特异表达的重组质粒.为以后的转基因动物的研究奠定了基础.
採用PCR技術剋隆瞭小鼠脂肪組織特異錶達的脂肪痠結閤蛋白ap2基因增彊子和啟動子,通過DNA重組技術將該基因增彊子和啟動子重組于pEGFP - N1真覈錶達載體上,構建pEGFP - N1 - ap2重組質粒,通過PCR擴增、酶切電泳分析和測序的方法對重組質粒進行鑒定,併轉染小鼠前脂肪細胞,通過熒光素酶活性檢測特異性錶達彊度.結果錶明,本實驗剋隆的ap2基因增彊子和啟動子的堿基組成與GenBank中的ap2基因序列完全一緻,通過DNA重組技術將該基因增彊子和啟動子重組于pEGFP- N1真覈錶達載體上,成功構建瞭脂肪組織特異錶達的重組質粒.為以後的轉基因動物的研究奠定瞭基礎.
채용PCR기술극륭료소서지방조직특이표체적지방산결합단백ap2기인증강자화계동자,통과DNA중조기술장해기인증강자화계동자중조우pEGFP - N1진핵표체재체상,구건pEGFP - N1 - ap2중조질립,통과PCR확증、매절전영분석화측서적방법대중조질립진행감정,병전염소서전지방세포,통과형광소매활성검측특이성표체강도.결과표명,본실험극륭적ap2기인증강자화계동자적감기조성여GenBank중적ap2기인서렬완전일치,통과DNA중조기술장해기인증강자화계동자중조우pEGFP- N1진핵표체재체상,성공구건료지방조직특이표체적중조질립.위이후적전기인동물적연구전정료기출.