中华泌尿外科杂志
中華泌尿外科雜誌
중화비뇨외과잡지
CHINESE JOURNAL OF UROLOGY
2003年
7期
463-465
,共3页
膀胱肿瘤%基因%治疗学
膀胱腫瘤%基因%治療學
방광종류%기인%치료학
目的探讨辐射诱导基因调控元件Egr-1调控的潮霉素磷酸转移酶和单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)融合基因(hytk)对体外膀胱癌细胞的杀伤作用. 方法采用重组DNA技术构建携带Egr-1调控序列的hytk基因表达载体,应用FuGENETM6系统转染膀胱癌细胞株EJ并检测hytk基因在辐射作用下的表达及联合更昔洛韦(GCV)对膀胱癌细胞的杀伤作用. 结果成功获得带Egr-1启动子的真核表达载体pCIneo/Egr-1-hytk,经FuGENETM6系统转染后经RT-PCR、Western Blot检测示hytk基因成功整合入EJ细胞中并在mRNA、蛋白质水平获得表达,辐射后24 h的转基因细胞hytk含量较照射前明显增高(P<0.05);辐射和GCV联合作用的转基因细胞杀伤率明显高于单纯GCV作用. 结论含有Egr-1启动子的hytk真核表达载体是膀胱癌基因治疗中新型、理想的候选载体之一.
目的探討輻射誘導基因調控元件Egr-1調控的潮黴素燐痠轉移酶和單純皰疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)融閤基因(hytk)對體外膀胱癌細胞的殺傷作用. 方法採用重組DNA技術構建攜帶Egr-1調控序列的hytk基因錶達載體,應用FuGENETM6繫統轉染膀胱癌細胞株EJ併檢測hytk基因在輻射作用下的錶達及聯閤更昔洛韋(GCV)對膀胱癌細胞的殺傷作用. 結果成功穫得帶Egr-1啟動子的真覈錶達載體pCIneo/Egr-1-hytk,經FuGENETM6繫統轉染後經RT-PCR、Western Blot檢測示hytk基因成功整閤入EJ細胞中併在mRNA、蛋白質水平穫得錶達,輻射後24 h的轉基因細胞hytk含量較照射前明顯增高(P<0.05);輻射和GCV聯閤作用的轉基因細胞殺傷率明顯高于單純GCV作用. 結論含有Egr-1啟動子的hytk真覈錶達載體是膀胱癌基因治療中新型、理想的候選載體之一.
목적탐토복사유도기인조공원건Egr-1조공적조매소린산전이매화단순포진병독흉감격매(HSV-TK)융합기인(hytk)대체외방광암세포적살상작용. 방법채용중조DNA기술구건휴대Egr-1조공서렬적hytk기인표체재체,응용FuGENETM6계통전염방광암세포주EJ병검측hytk기인재복사작용하적표체급연합경석락위(GCV)대방광암세포적살상작용. 결과성공획득대Egr-1계동자적진핵표체재체pCIneo/Egr-1-hytk,경FuGENETM6계통전염후경RT-PCR、Western Blot검측시hytk기인성공정합입EJ세포중병재mRNA、단백질수평획득표체,복사후24 h적전기인세포hytk함량교조사전명현증고(P<0.05);복사화GCV연합작용적전기인세포살상솔명현고우단순GCV작용. 결론함유Egr-1계동자적hytk진핵표체재체시방광암기인치료중신형、이상적후선재체지일.