生物医学工程学杂志
生物醫學工程學雜誌
생물의학공정학잡지
2004年
2期
208-211
,共4页
血管平滑肌细胞%脉动流剪应力%寡聚核苷酸基因芯片技术%基因表达谱
血管平滑肌細胞%脈動流剪應力%寡聚覈苷痠基因芯片技術%基因錶達譜
혈관평활기세포%맥동류전응력%과취핵감산기인심편기술%기인표체보
采用本实验室自行设计和研制的Flow Chamber血液流动剪切装置,从细胞生物力学的角度,采用寡聚核苷酸微阵列技术,探讨人体脐动脉平滑肌细胞(VSMC)在脉动流剪应力作用下的基因差异性表达,以及相关基因表达的调控;比较脉动流和定常流两种剪应力作用下VSMC基因表达的差异.通过提取细胞总RNA,逆转录合成单链cDNA,双链cDNA,体外转录合成生物素标记的cDNA与基因进行芯片杂交,经抗体的检测标记荧光染料Cy3,用基因芯片扫描仪进行基因芯片的图像扫描.结果发现,与对照组比较,经脉动流剪应力作用后,血管平滑肌细胞有1 330个基因出现差异表达;经定常流剪应力作用后,与对照组比较,有2 676个基因出现差异表达;比较定常流和脉动流两组的血管平滑肌细胞基因,有2 297个基因存在表达差异.实验表明,近生理状态的脉动流与定常流两种剪应力,对体外培养的人体血管平滑肌细胞的基因表达,在数量、范围和调控水平上有着很大的差异.提示在生理或病理情况下,血液流体力学的变化,可诱导血管平滑肌细胞基因在mRNA表达水平出现不同的应力响应.
採用本實驗室自行設計和研製的Flow Chamber血液流動剪切裝置,從細胞生物力學的角度,採用寡聚覈苷痠微陣列技術,探討人體臍動脈平滑肌細胞(VSMC)在脈動流剪應力作用下的基因差異性錶達,以及相關基因錶達的調控;比較脈動流和定常流兩種剪應力作用下VSMC基因錶達的差異.通過提取細胞總RNA,逆轉錄閤成單鏈cDNA,雙鏈cDNA,體外轉錄閤成生物素標記的cDNA與基因進行芯片雜交,經抗體的檢測標記熒光染料Cy3,用基因芯片掃描儀進行基因芯片的圖像掃描.結果髮現,與對照組比較,經脈動流剪應力作用後,血管平滑肌細胞有1 330箇基因齣現差異錶達;經定常流剪應力作用後,與對照組比較,有2 676箇基因齣現差異錶達;比較定常流和脈動流兩組的血管平滑肌細胞基因,有2 297箇基因存在錶達差異.實驗錶明,近生理狀態的脈動流與定常流兩種剪應力,對體外培養的人體血管平滑肌細胞的基因錶達,在數量、範圍和調控水平上有著很大的差異.提示在生理或病理情況下,血液流體力學的變化,可誘導血管平滑肌細胞基因在mRNA錶達水平齣現不同的應力響應.
채용본실험실자행설계화연제적Flow Chamber혈액류동전절장치,종세포생물역학적각도,채용과취핵감산미진렬기술,탐토인체제동맥평활기세포(VSMC)재맥동류전응력작용하적기인차이성표체,이급상관기인표체적조공;비교맥동류화정상류량충전응력작용하VSMC기인표체적차이.통과제취세포총RNA,역전록합성단련cDNA,쌍련cDNA,체외전록합성생물소표기적cDNA여기인진행심편잡교,경항체적검측표기형광염료Cy3,용기인심편소묘의진행기인심편적도상소묘.결과발현,여대조조비교,경맥동류전응력작용후,혈관평활기세포유1 330개기인출현차이표체;경정상류전응력작용후,여대조조비교,유2 676개기인출현차이표체;비교정상류화맥동류량조적혈관평활기세포기인,유2 297개기인존재표체차이.실험표명,근생리상태적맥동류여정상류량충전응력,대체외배양적인체혈관평활기세포적기인표체,재수량、범위화조공수평상유착흔대적차이.제시재생리혹병리정황하,혈액류체역학적변화,가유도혈관평활기세포기인재mRNA표체수평출현불동적응력향응.
