现代消化及介入诊疗
現代消化及介入診療
현대소화급개입진료
MODERN DIGESTION & INTERVENTION
2008年
1期
1-5
,共5页
南清振%高蕾%肖冰%杨希山%张振书
南清振%高蕾%肖冰%楊希山%張振書
남청진%고뢰%초빙%양희산%장진서
大肠癌%噬菌体抗体库%Fab抗体
大腸癌%噬菌體抗體庫%Fab抗體
대장암%서균체항체고%Fab항체
目的 构建及初步鉴定大肠癌噬菌体抗体Fab呈现库.方法 分离大肠癌患者外周血淋巴细胞,提取淋巴细胞总RNA,逆转录成cDNA.用相应引物进行PCR,扩增出轻链和重链Fd段基因,经酶切后分别和噬粒载体pComb3连接,再经电穿孔转化大肠杆菌XLl-Blue菌株.将轻链和重链Fd基因先后克隆人pComb3中.结果 从分离出的淋巴细胞中提取到高质量RNA,RT-PCR分别扩增出约680 bp大小的κ、λ和Fd基因.PCR 产物和载体经纯化、双酶切后进行连接转化,成功地构建了人源性Fab抗体基因库,库容量达2.1×107,轻链K、κ、λ和重链Fd基因均插入pComb3的重组率为50%.结论 构建了大肠癌患者自然致敏抗体Fab段噬菌体呈现库,为筛选大肠癌相关抗体打下基础.
目的 構建及初步鑒定大腸癌噬菌體抗體Fab呈現庫.方法 分離大腸癌患者外週血淋巴細胞,提取淋巴細胞總RNA,逆轉錄成cDNA.用相應引物進行PCR,擴增齣輕鏈和重鏈Fd段基因,經酶切後分彆和噬粒載體pComb3連接,再經電穿孔轉化大腸桿菌XLl-Blue菌株.將輕鏈和重鏈Fd基因先後剋隆人pComb3中.結果 從分離齣的淋巴細胞中提取到高質量RNA,RT-PCR分彆擴增齣約680 bp大小的κ、λ和Fd基因.PCR 產物和載體經純化、雙酶切後進行連接轉化,成功地構建瞭人源性Fab抗體基因庫,庫容量達2.1×107,輕鏈K、κ、λ和重鏈Fd基因均插入pComb3的重組率為50%.結論 構建瞭大腸癌患者自然緻敏抗體Fab段噬菌體呈現庫,為篩選大腸癌相關抗體打下基礎.
목적 구건급초보감정대장암서균체항체Fab정현고.방법 분리대장암환자외주혈림파세포,제취림파세포총RNA,역전록성cDNA.용상응인물진행PCR,확증출경련화중련Fd단기인,경매절후분별화서립재체pComb3련접,재경전천공전화대장간균XLl-Blue균주.장경련화중련Fd기인선후극륭인pComb3중.결과 종분리출적림파세포중제취도고질량RNA,RT-PCR분별확증출약680 bp대소적κ、λ화Fd기인.PCR 산물화재체경순화、쌍매절후진행련접전화,성공지구건료인원성Fab항체기인고,고용량체2.1×107,경련K、κ、λ화중련Fd기인균삽입pComb3적중조솔위50%.결론 구건료대장암환자자연치민항체Fab단서균체정현고,위사선대장암상관항체타하기출.
