中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2011年
12期
1660-1665
,共6页
齐元麟%张明芳%赵蓉%张旭%吴玲珊%林建银
齊元麟%張明芳%趙蓉%張旭%吳玲珊%林建銀
제원린%장명방%조용%장욱%오령산%림건은
蛇毒%中华眼镜蛇%L-氨基酸氧化酶%细胞增殖%细胞周期%膀胱癌
蛇毒%中華眼鏡蛇%L-氨基痠氧化酶%細胞增殖%細胞週期%膀胱癌
사독%중화안경사%L-안기산양화매%세포증식%세포주기%방광암
目的 研究眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶(Naja atra L-a-mino acid oxidase,NA-LAAO)对人膀胱癌细胞株ECV304的生长抑制作用,探讨其作用机制.方法 CCK-8法测定NA-LAAO的细胞毒性及对细胞增殖抑制能力;流式细胞术分析NA-LAAO对ECV304细胞周期的影响;实时定量PCR和Western blot分析细胞周期相关基因mRNA和蛋白质表达.结果 NA-LAAO对ECV304细胞有强烈抑制作用,且呈剂量-效应和时间-效应关系.NA-LAAO处理6、12、24 h对ECV304的IC50分别为(1.54±0.23)、(1.09±0.15)和(0.48±0.14)mg·L-1;细胞生长曲线显示,0.156 mg·L-1的NA-LAAO作用4 d可明显抑制ECV304细胞增殖;0.313 mg·L-1从d 2起就有明显效果;0.625 mg·L-1处理后细胞多数死亡;流式细胞术分析提示NA-LAAO可使ECV304细胞阻滞在G1期,并呈量效关系;实时定量PCR结果显示,NA-LAAO可下调Cyclin A2、B1、D1、E1、CDK2、CDK6、Survivin、Skp2,上调p21、p16、p27的表达,Western blot结果显示NA-LAAO可下调Cyclin A、CDK2、CDK6,上调p21,与实时PCR结果一致.结论 NA-LAAO可通过调节细胞周期相关分子,使ECV304细胞阻滞在G1期,抑制细胞增殖.
目的 研究眼鏡蛇毒L-氨基痠氧化酶(Naja atra L-a-mino acid oxidase,NA-LAAO)對人膀胱癌細胞株ECV304的生長抑製作用,探討其作用機製.方法 CCK-8法測定NA-LAAO的細胞毒性及對細胞增殖抑製能力;流式細胞術分析NA-LAAO對ECV304細胞週期的影響;實時定量PCR和Western blot分析細胞週期相關基因mRNA和蛋白質錶達.結果 NA-LAAO對ECV304細胞有彊烈抑製作用,且呈劑量-效應和時間-效應關繫.NA-LAAO處理6、12、24 h對ECV304的IC50分彆為(1.54±0.23)、(1.09±0.15)和(0.48±0.14)mg·L-1;細胞生長麯線顯示,0.156 mg·L-1的NA-LAAO作用4 d可明顯抑製ECV304細胞增殖;0.313 mg·L-1從d 2起就有明顯效果;0.625 mg·L-1處理後細胞多數死亡;流式細胞術分析提示NA-LAAO可使ECV304細胞阻滯在G1期,併呈量效關繫;實時定量PCR結果顯示,NA-LAAO可下調Cyclin A2、B1、D1、E1、CDK2、CDK6、Survivin、Skp2,上調p21、p16、p27的錶達,Western blot結果顯示NA-LAAO可下調Cyclin A、CDK2、CDK6,上調p21,與實時PCR結果一緻.結論 NA-LAAO可通過調節細胞週期相關分子,使ECV304細胞阻滯在G1期,抑製細胞增殖.
목적 연구안경사독L-안기산양화매(Naja atra L-a-mino acid oxidase,NA-LAAO)대인방광암세포주ECV304적생장억제작용,탐토기작용궤제.방법 CCK-8법측정NA-LAAO적세포독성급대세포증식억제능력;류식세포술분석NA-LAAO대ECV304세포주기적영향;실시정량PCR화Western blot분석세포주기상관기인mRNA화단백질표체.결과 NA-LAAO대ECV304세포유강렬억제작용,차정제량-효응화시간-효응관계.NA-LAAO처리6、12、24 h대ECV304적IC50분별위(1.54±0.23)、(1.09±0.15)화(0.48±0.14)mg·L-1;세포생장곡선현시,0.156 mg·L-1적NA-LAAO작용4 d가명현억제ECV304세포증식;0.313 mg·L-1종d 2기취유명현효과;0.625 mg·L-1처리후세포다수사망;류식세포술분석제시NA-LAAO가사ECV304세포조체재G1기,병정량효관계;실시정량PCR결과현시,NA-LAAO가하조Cyclin A2、B1、D1、E1、CDK2、CDK6、Survivin、Skp2,상조p21、p16、p27적표체,Western blot결과현시NA-LAAO가하조Cyclin A、CDK2、CDK6,상조p21,여실시PCR결과일치.결론 NA-LAAO가통과조절세포주기상관분자,사ECV304세포조체재G1기,억제세포증식.
