浙江大学学报（农业与生命科学版）
浙江大學學報（農業與生命科學版）
절강대학학보（농업여생명과학판）
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY(AGRICULTURE & LIFE SCIENCES)
2012年
3期
347-354
,共8页
大型溞%间接非竞争酶联免疫吸附法%胆碱酯酶免疫含量
大型溞%間接非競爭酶聯免疫吸附法%膽堿酯酶免疫含量
대형소%간접비경쟁매련면역흡부법%담감지매면역함량
用达到电泳纯的大型溞(Daphnia magna)胆碱酯酶(cholinesterase,ChE)免疫BALB/c小鼠,得到效价达1∶8000的鼠抗大型溞ChE多克隆抗血清；通过优化抗原抗体反应条件,建立定量分析大型溞ChE含量的间接非竞争酶联免疫吸附法(indirect and non-competitive enzyme-linked immunosorbent assay).结果表明:此方法检测灵敏度为24 ng·mL-1；经免疫交叉反应鉴定,所获抗血清与5、10 μg·mL-1标准蛋白质和其他生物如花翅摇蚊、尖额溞、斑马鱼(脑、脑除外的整体)、家蚕、意大利蜜蜂、赤子爱胜蚯蚓、非洲爪蟾(蝌蚪)等来源的ChE交叉反应率分别为:＜0.25％、＜0.25％、2.13％、10.19％、3.88％、3.56％、2.81％、3.93％、5.00％和2.75％,具较高的特异性.说明用本试验得到的抗血清建立的间接非竞争酶联免疫吸附法可用于大型溞体内ChE含量的测定,以利于在农药暴露环境下大型溞体内ChE活性的精确检测.
用達到電泳純的大型溞(Daphnia magna)膽堿酯酶(cholinesterase,ChE)免疫BALB/c小鼠,得到效價達1∶8000的鼠抗大型溞ChE多剋隆抗血清；通過優化抗原抗體反應條件,建立定量分析大型溞ChE含量的間接非競爭酶聯免疫吸附法(indirect and non-competitive enzyme-linked immunosorbent assay).結果錶明:此方法檢測靈敏度為24 ng·mL-1；經免疫交扠反應鑒定,所穫抗血清與5、10 μg·mL-1標準蛋白質和其他生物如花翅搖蚊、尖額溞、斑馬魚(腦、腦除外的整體)、傢蠶、意大利蜜蜂、赤子愛勝蚯蚓、非洲爪蟾(蝌蚪)等來源的ChE交扠反應率分彆為:＜0.25％、＜0.25％、2.13％、10.19％、3.88％、3.56％、2.81％、3.93％、5.00％和2.75％,具較高的特異性.說明用本試驗得到的抗血清建立的間接非競爭酶聯免疫吸附法可用于大型溞體內ChE含量的測定,以利于在農藥暴露環境下大型溞體內ChE活性的精確檢測.
용체도전영순적대형소(Daphnia magna)담감지매(cholinesterase,ChE)면역BALB/c소서,득도효개체1∶8000적서항대형소ChE다극륭항혈청；통과우화항원항체반응조건,건립정량분석대형소ChE함량적간접비경쟁매련면역흡부법(indirect and non-competitive enzyme-linked immunosorbent assay).결과표명:차방법검측령민도위24 ng·mL-1；경면역교차반응감정,소획항혈청여5、10 μg·mL-1표준단백질화기타생물여화시요문、첨액소、반마어(뇌、뇌제외적정체)、가잠、의대리밀봉、적자애성구인、비주조섬(과두)등래원적ChE교차반응솔분별위:＜0.25％、＜0.25％、2.13％、10.19％、3.88％、3.56％、2.81％、3.93％、5.00％화2.75％,구교고적특이성.설명용본시험득도적항혈청건립적간접비경쟁매련면역흡부법가용우대형소체내ChE함량적측정,이리우재농약폭로배경하대형소체내ChE활성적정학검측.
