中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2000年
5期
606-611
,共6页
口如琴%王蔚%李令媛%茹炳根
口如琴%王蔚%李令媛%茹炳根
구여금%왕위%리령원%여병근
小肠三叶因子%突变体%生物活性
小腸三葉因子%突變體%生物活性
소장삼협인자%돌변체%생물활성
用PCR方法构建了一个不能形成二聚体的C端缺失半胱氨酸57的hITF突变体.将其克隆到大肠杆菌表达载体pGEX-4T-1中,ITPG诱导表达,融合蛋白经Glutathione-Sepharose4B亲和层析,凝血酶酶切和SephacrylS100纯化,得到突变体蛋白.SDS-PAGE,氨基酸组成,飞行质谱,N端氨基酸序列测定结果与期望值一致.研究表明突变体的生物学活性有所降低.对胃蛋白酶作用的稳定性降低.
用PCR方法構建瞭一箇不能形成二聚體的C耑缺失半胱氨痠57的hITF突變體.將其剋隆到大腸桿菌錶達載體pGEX-4T-1中,ITPG誘導錶達,融閤蛋白經Glutathione-Sepharose4B親和層析,凝血酶酶切和SephacrylS100純化,得到突變體蛋白.SDS-PAGE,氨基痠組成,飛行質譜,N耑氨基痠序列測定結果與期望值一緻.研究錶明突變體的生物學活性有所降低.對胃蛋白酶作用的穩定性降低.
용PCR방법구건료일개불능형성이취체적C단결실반광안산57적hITF돌변체.장기극륭도대장간균표체재체pGEX-4T-1중,ITPG유도표체,융합단백경Glutathione-Sepharose4B친화층석,응혈매매절화SephacrylS100순화,득도돌변체단백.SDS-PAGE,안기산조성,비행질보,N단안기산서렬측정결과여기망치일치.연구표명돌변체적생물학활성유소강저.대위단백매작용적은정성강저.
