西南农业大学学报(自然科学版)
西南農業大學學報(自然科學版)
서남농업대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF SOUTHWEST AGRICULTURAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2004年
3期
249-253
,共5页
宋洪元%丁建刚%曹必好%雷建军%宋明
宋洪元%丁建剛%曹必好%雷建軍%宋明
송홍원%정건강%조필호%뢰건군%송명
Cre/loxp定位重组系统%雄性不育基因%恢复基因%表达载体构建
Cre/loxp定位重組繫統%雄性不育基因%恢複基因%錶達載體構建
Cre/loxp정위중조계통%웅성불육기인%회복기인%표체재체구건
结合Cre/loxp定位重组系统和杂种一代的育种特点,构建了雄性不育基因表达载体pCABARTABn和相应的恢复基因表达载体pBINPLUSCre.将位于质粒pTIABn中的雄性不育基因表达盒(含TA 29启动子、barnase基因及Nos终止子)切下插入中间克隆载体pGloxp 2个同向lox位点之间,再将上述表达盒连同lox位点切下插入pCAMBar,获得以除草剂Basta为筛选剂的雄性不育基因表达载体pCABARTABn.PCR方法从溶原菌BM 25.8基因组DNA扩增出Cre基因,克隆测序验证无误后插入PBI 525 CaMV 35 S-35 S双启动子和Nos终止子之间,再将表达盒切下插入pBINPLUS质粒相应位点,得到恢复基因植物表达载体pBINPLUSCre.
結閤Cre/loxp定位重組繫統和雜種一代的育種特點,構建瞭雄性不育基因錶達載體pCABARTABn和相應的恢複基因錶達載體pBINPLUSCre.將位于質粒pTIABn中的雄性不育基因錶達盒(含TA 29啟動子、barnase基因及Nos終止子)切下插入中間剋隆載體pGloxp 2箇同嚮lox位點之間,再將上述錶達盒連同lox位點切下插入pCAMBar,穫得以除草劑Basta為篩選劑的雄性不育基因錶達載體pCABARTABn.PCR方法從溶原菌BM 25.8基因組DNA擴增齣Cre基因,剋隆測序驗證無誤後插入PBI 525 CaMV 35 S-35 S雙啟動子和Nos終止子之間,再將錶達盒切下插入pBINPLUS質粒相應位點,得到恢複基因植物錶達載體pBINPLUSCre.
결합Cre/loxp정위중조계통화잡충일대적육충특점,구건료웅성불육기인표체재체pCABARTABn화상응적회복기인표체재체pBINPLUSCre.장위우질립pTIABn중적웅성불육기인표체합(함TA 29계동자、barnase기인급Nos종지자)절하삽입중간극륭재체pGloxp 2개동향lox위점지간,재장상술표체합련동lox위점절하삽입pCAMBar,획득이제초제Basta위사선제적웅성불육기인표체재체pCABARTABn.PCR방법종용원균BM 25.8기인조DNA확증출Cre기인,극륭측서험증무오후삽입PBI 525 CaMV 35 S-35 S쌍계동자화Nos종지자지간,재장표체합절하삽입pBINPLUS질립상응위점,득도회복기인식물표체재체pBINPLUSCre.
