CAJ | 학술논문

目的研究嗅成鞘细胞条件培养基(OECCM)对PC12细胞促分化作用及其对-OH自由基损伤分化后细胞的保护作用.方法采用原代分离培养的方法培养和纯化嗅成鞘细胞,收集其培养上清作为OECCM,然后用其培养PC12细胞,培养3 d后,进行细胞形态学观察及β-tubulin免疫细胞化学染色,同时在同一批细胞中加入100μmol/L FeSO4和50μmol/L H2O2作用20 min,再用OECCM继续培养48 h,然后进行MTT对细胞活性进行检测和存活细胞计数.结果用OECCM培养的PC12细胞长有突起,形态酷似神经元,并且β-tubulin免疫细胞化学染色呈阳性,而对照组细胞在同样培养时间里,没有明显的形态变化,β-tubulin染色呈阴性.用FeSO4和H2O2产生的-OH自由基对分化后的PC12细胞进行损伤,发现继续用OECCM培养后,反映细胞活性的A值为0.346 5±0.032,对照组0.201 8±0.034(P＜0.01);同时两组细胞存活数目的百分比分别为:实验组为(56.7±5.9)%,对照组为(23.8±7.4)%(P＜0.01).结论嗅成鞘细胞可以分泌有促PC12细胞分化作用的分子和对分化后的细胞在损伤时有保护作用的分子.
목적연구후성초세포조건배양기(OECCM)대PC12세포촉분화작용급기대-OH자유기손상분화후세포적보호작용.방법채용원대분리배양적방법배양화순화후성초세포,수집기배양상청작위OECCM,연후용기배양PC12세포,배양3 d후,진행세포형태학관찰급β-tubulin면역세포화학염색,동시재동일비세포중가입100μmol/L FeSO4화50μmol/L H2O2작용20 min,재용OECCM계속배양48 h,연후진행MTT대세포활성진행검측화존활세포계수.결과용OECCM배양적PC12세포장유돌기,형태혹사신경원,병차β-tubulin면역세포화학염색정양성,이대조조세포재동양배양시간리,몰유명현적형태변화,β-tubulin염색정음성.용FeSO4화H2O2산생적-OH자유기대분화후적PC12세포진행손상,발현계속용OECCM배양후,반영세포활성적A치위0.346 5±0.032,대조조0.201 8±0.034(P＜0.01);동시량조세포존활수목적백분비분별위:실험조위(56.7±5.9)%,대조조위(23.8±7.4)%(P＜0.01).결론후성초세포가이분비유촉PC12세포분화작용적분자화대분화후적세포재손상시유보호작용적분자.