解放军医学杂志
解放軍醫學雜誌
해방군의학잡지
MEDICAL JOURNAL OF CHINESE PEOPLE'S LIBERATION ARMY
2006年
3期
227-230
,共4页
邵紫韫%刘志锋%彭毅%邓鹏%姜勇
邵紫韞%劉誌鋒%彭毅%鄧鵬%薑勇
소자운%류지봉%팽의%산붕%강용
干扰素诱导蛋白10%脂多糖类%基因,报告
榦擾素誘導蛋白10%脂多糖類%基因,報告
간우소유도단백10%지다당류%기인,보고
目的克隆干扰素诱导蛋白10(IP-10)5′非编码区(NCR)片段,检测克隆的IP-10启动子驱动的荧光素酶报告基因在LPS激活的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的转录活性.方法提取人外周血淋巴细胞基因组DNA,以其为模板,利用巢式PCR扩增人IP-10启动子片段,测序正确后克隆入荧光素酶报告基因表达载体pGL3;将重组质粒pGL3/IP-10P导入HUVEC细胞,检测LPS刺激下荧光素酶活性.结果正确克隆出人IP-10启动子(-2028~-1)片段,成功构建了pGL3/IP-10P报告基因表达载体;证实了LPS可诱导HUVEC细胞中IP-10的高表达.结论成功克隆出人的IP-10启动子片段,并利用荧光素报告基因证实了在HUVEC细胞中LPS可诱导IP-10高转录表达,为深入研究LPS诱导IP-10转录表达的调控机制提供了基础.
目的剋隆榦擾素誘導蛋白10(IP-10)5′非編碼區(NCR)片段,檢測剋隆的IP-10啟動子驅動的熒光素酶報告基因在LPS激活的人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)中的轉錄活性.方法提取人外週血淋巴細胞基因組DNA,以其為模闆,利用巢式PCR擴增人IP-10啟動子片段,測序正確後剋隆入熒光素酶報告基因錶達載體pGL3;將重組質粒pGL3/IP-10P導入HUVEC細胞,檢測LPS刺激下熒光素酶活性.結果正確剋隆齣人IP-10啟動子(-2028~-1)片段,成功構建瞭pGL3/IP-10P報告基因錶達載體;證實瞭LPS可誘導HUVEC細胞中IP-10的高錶達.結論成功剋隆齣人的IP-10啟動子片段,併利用熒光素報告基因證實瞭在HUVEC細胞中LPS可誘導IP-10高轉錄錶達,為深入研究LPS誘導IP-10轉錄錶達的調控機製提供瞭基礎.
목적극륭간우소유도단백10(IP-10)5′비편마구(NCR)편단,검측극륭적IP-10계동자구동적형광소매보고기인재LPS격활적인제정맥내피세포(HUVEC)중적전록활성.방법제취인외주혈림파세포기인조DNA,이기위모판,이용소식PCR확증인IP-10계동자편단,측서정학후극륭입형광소매보고기인표체재체pGL3;장중조질립pGL3/IP-10P도입HUVEC세포,검측LPS자격하형광소매활성.결과정학극륭출인IP-10계동자(-2028~-1)편단,성공구건료pGL3/IP-10P보고기인표체재체;증실료LPS가유도HUVEC세포중IP-10적고표체.결론성공극륭출인적IP-10계동자편단,병이용형광소보고기인증실료재HUVEC세포중LPS가유도IP-10고전록표체,위심입연구LPS유도IP-10전록표체적조공궤제제공료기출.