湖南中医药大学学报
湖南中醫藥大學學報
호남중의약대학학보
JOURNAL OF HUNAN COLLEGE OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
2007年
1期
33-35
,共3页
张波%卢芳国%谭峰%阳力争
張波%盧芳國%譚峰%暘力爭
장파%로방국%담봉%양력쟁
PDIP1%PCR%定点突变
PDIP1%PCR%定點突變
PDIP1%PCR%정점돌변
目的 将DNA聚合酶δ相互作用蛋白1(PDIP1)编码序列562位碱基T突变为G.方法 利用定点突变PCR对PDIP1编码序列进行定点突变,然后将PCR定点突变产物和pGEX-4T-2载体经EcoR I与Sal I酶切,再利用连接酶将它们定向连接起来形成pGEX-4T-2-PDIP1重组质粒,转化E.coli DH5α感受态,时所得重组质粒进行酶切和测序.结果 第1轮和第2轮PCR都得到了预期大小的扩增片段,重组质粒经酶切也得到预期大小的片段,测序结果表明已成功将PDIP1编码序列第562位碱基T突变为G.结论 利用PCR定点突变是基因点突变的一种简单实用的好方法.
目的 將DNA聚閤酶δ相互作用蛋白1(PDIP1)編碼序列562位堿基T突變為G.方法 利用定點突變PCR對PDIP1編碼序列進行定點突變,然後將PCR定點突變產物和pGEX-4T-2載體經EcoR I與Sal I酶切,再利用連接酶將它們定嚮連接起來形成pGEX-4T-2-PDIP1重組質粒,轉化E.coli DH5α感受態,時所得重組質粒進行酶切和測序.結果 第1輪和第2輪PCR都得到瞭預期大小的擴增片段,重組質粒經酶切也得到預期大小的片段,測序結果錶明已成功將PDIP1編碼序列第562位堿基T突變為G.結論 利用PCR定點突變是基因點突變的一種簡單實用的好方法.
목적 장DNA취합매δ상호작용단백1(PDIP1)편마서렬562위감기T돌변위G.방법 이용정점돌변PCR대PDIP1편마서렬진행정점돌변,연후장PCR정점돌변산물화pGEX-4T-2재체경EcoR I여Sal I매절,재이용련접매장타문정향련접기래형성pGEX-4T-2-PDIP1중조질립,전화E.coli DH5α감수태,시소득중조질립진행매절화측서.결과 제1륜화제2륜PCR도득도료예기대소적확증편단,중조질립경매절야득도예기대소적편단,측서결과표명이성공장PDIP1편마서렬제562위감기T돌변위G.결론 이용PCR정점돌변시기인점돌변적일충간단실용적호방법.
