世界华人消化杂志
世界華人消化雜誌
세계화인소화잡지
WORLD CHINESE JOURNAL OF DIGESTOLOGY
2008年
5期
473-478
,共6页
骨髓%间充质干细胞%类肝细胞%肝细胞生长因子%成纤维细胞生长因子-4
骨髓%間充質榦細胞%類肝細胞%肝細胞生長因子%成纖維細胞生長因子-4
골수%간충질간세포%류간세포%간세포생장인자%성섬유세포생장인자-4
目的:探讨实验性大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)体外培养、诱导的最优条件,为MSCs治疗临床重症肝病患者提供参考依据.方法:采用密度梯度离心法和贴壁法分离大鼠MSCs.经培养传代获得纯化的MSCs.采用析因实验,设不同诱导时间、不同浓度的FBS、不同浓度的细胞因子为3个因素,每个因素设不同水平,对纯化的MSCs进行分组诱导培养.留取15、2l、27 d细胞培养液进行白蛋白(A1b)、甲胎蛋白(AFP)检测;于27 d时收集细胞爬片,采用过碘酸希夫(PAs)实验进行糖原染色和免疫细胞化学染色检测MSCs中CK-18和CK-19.结果:诱导15、21、27 d,各MSCs诱导组AFP水平均高于MSCs非诱导组(P＜0.01),21 d诱导组AFP水平最高:15 d各MSCs诱导组与MSCs非诱导组白蛋白水平无统计学意义,21、27d各MSCs诱导组白蛋白水平均高于MSCs非诱导组(P＜0.01),27 d诱导组白蛋白水平最高.27d各MSCs诱导组糖原染色阳性,免疫细胞化学染色CK-18、CK-19均阳性,而MSCs非诱导组糖原染色、CK-18、CK-19均阴性.多因素方差分析表明,Mscs体外最佳诱导条件为含200mL/LFBS的DMEM+肝细胞生长因子(HGF)20Ug/L+成纤维细胞生长因子-4(FGF-4)20UG/L.结论:HGF和FGF-4可在体外诱导实验性大鼠Mscs分化为具有肝细胞样细胞表型和功能的类肝细胞:不同浓度的FBS、HGF和FGF-4影响MSCs的体外分化;MSCs可作为治疗临床重症肝病的一种细胞来源.
目的:探討實驗性大鼠骨髓間充質榦細胞(MSCs)體外培養、誘導的最優條件,為MSCs治療臨床重癥肝病患者提供參攷依據.方法:採用密度梯度離心法和貼壁法分離大鼠MSCs.經培養傳代穫得純化的MSCs.採用析因實驗,設不同誘導時間、不同濃度的FBS、不同濃度的細胞因子為3箇因素,每箇因素設不同水平,對純化的MSCs進行分組誘導培養.留取15、2l、27 d細胞培養液進行白蛋白(A1b)、甲胎蛋白(AFP)檢測;于27 d時收集細胞爬片,採用過碘痠希伕(PAs)實驗進行糖原染色和免疫細胞化學染色檢測MSCs中CK-18和CK-19.結果:誘導15、21、27 d,各MSCs誘導組AFP水平均高于MSCs非誘導組(P＜0.01),21 d誘導組AFP水平最高:15 d各MSCs誘導組與MSCs非誘導組白蛋白水平無統計學意義,21、27d各MSCs誘導組白蛋白水平均高于MSCs非誘導組(P＜0.01),27 d誘導組白蛋白水平最高.27d各MSCs誘導組糖原染色暘性,免疫細胞化學染色CK-18、CK-19均暘性,而MSCs非誘導組糖原染色、CK-18、CK-19均陰性.多因素方差分析錶明,Mscs體外最佳誘導條件為含200mL/LFBS的DMEM+肝細胞生長因子(HGF)20Ug/L+成纖維細胞生長因子-4(FGF-4)20UG/L.結論:HGF和FGF-4可在體外誘導實驗性大鼠Mscs分化為具有肝細胞樣細胞錶型和功能的類肝細胞:不同濃度的FBS、HGF和FGF-4影響MSCs的體外分化;MSCs可作為治療臨床重癥肝病的一種細胞來源.
목적:탐토실험성대서골수간충질간세포(MSCs)체외배양、유도적최우조건,위MSCs치료림상중증간병환자제공삼고의거.방법:채용밀도제도리심법화첩벽법분리대서MSCs.경배양전대획득순화적MSCs.채용석인실험,설불동유도시간、불동농도적FBS、불동농도적세포인자위3개인소,매개인소설불동수평,대순화적MSCs진행분조유도배양.류취15、2l、27 d세포배양액진행백단백(A1b)、갑태단백(AFP)검측;우27 d시수집세포파편,채용과전산희부(PAs)실험진행당원염색화면역세포화학염색검측MSCs중CK-18화CK-19.결과:유도15、21、27 d,각MSCs유도조AFP수평균고우MSCs비유도조(P＜0.01),21 d유도조AFP수평최고:15 d각MSCs유도조여MSCs비유도조백단백수평무통계학의의,21、27d각MSCs유도조백단백수평균고우MSCs비유도조(P＜0.01),27 d유도조백단백수평최고.27d각MSCs유도조당원염색양성,면역세포화학염색CK-18、CK-19균양성,이MSCs비유도조당원염색、CK-18、CK-19균음성.다인소방차분석표명,Mscs체외최가유도조건위함200mL/LFBS적DMEM+간세포생장인자(HGF)20Ug/L+성섬유세포생장인자-4(FGF-4)20UG/L.결론:HGF화FGF-4가재체외유도실험성대서Mscs분화위구유간세포양세포표형화공능적류간세포:불동농도적FBS、HGF화FGF-4영향MSCs적체외분화;MSCs가작위치료림상중증간병적일충세포래원.
