CAJ | 학술논문

目的:构建猫视神经慢性损伤相关差异表达基因消减cDNA文库.方法:15只成年家猫随机分为正常对照组、视神经压迫4周组和视神经压迫8周组(n=5),压迫4周组和压迫8周组猫利用球囊植入法建立慢性视神经损伤模型.取各组动物视神经,TRIzol法提取总RNA,SMART技术合成cDNA,随后利用抑制消减杂交方法分离受压4周和8周视神经中差异表达基因的cDNA片段,将其与T载体进行T/A连接构建文库,将连接产物用氯化钙转化法转化大肠杆菌进行文库扩增和蓝白斑筛选,随机挑取300个白色克隆进行菌落PCR鉴定.结果:菌落PCR扩增显示每个文库80%的克隆中均有200～800 bp的插入片段.结论:成功构建猫视神经慢性损伤相关差异表达基因消减cDNA文库,为进一步筛选、克隆慢性视神经损伤相关差异表达基因奠定了基础.
목적:구건묘시신경만성손상상관차이표체기인소감cDNA문고.방법:15지성년가묘수궤분위정상대조조、시신경압박4주조화시신경압박8주조(n=5),압박4주조화압박8주조묘이용구낭식입법건립만성시신경손상모형.취각조동물시신경,TRIzol법제취총RNA,SMART기술합성cDNA,수후이용억제소감잡교방법분리수압4주화8주시신경중차이표체기인적cDNA편단,장기여T재체진행T/A련접구건문고,장련접산물용록화개전화법전화대장간균진행문고확증화람백반사선,수궤도취300개백색극륭진행균락PCR감정.결과:균락PCR확증현시매개문고80%적극륭중균유200～800 bp적삽입편단.결론:성공구건묘시신경만성손상상관차이표체기인소감cDNA문고,위진일보사선、극륭만성시신경손상상관차이표체기인전정료기출.