宁夏大学学报（自然科学版）
寧夏大學學報（自然科學版）
저하대학학보（자연과학판）
2008年
4期
340-342
,共3页
李敏%马爱瑛%王玉炯%李稷亮%周栋%罗惠霞
李敏%馬愛瑛%王玉炯%李稷亮%週棟%囉惠霞
리민%마애영%왕옥형%리직량%주동%라혜하
组织型纤溶酶原激活剂%rPA(KN)%突变体%瞬时表达
組織型纖溶酶原激活劑%rPA(KN)%突變體%瞬時錶達
조직형섬용매원격활제%rPA(KN)%돌변체%순시표체
采用定点突变技术,对真核表达载体pCSRK上的目的片段rPA(K)进行突变,获得了含有突变体rPA(KN)(N184→Q)的真核表达载体pCSRKN.酶切和测序结果证明,成功去除了184位的糖基化位点.用LipofectamineTM 2000 Reagent将pCSRKN转染至COS-7细胞,取转染后不同培养时间上清,以FAPA法进行检测.结果表明,表达产物具有良好的溶圈活性,从而验证了pCSRKN在真核系统表达的可行性.
採用定點突變技術,對真覈錶達載體pCSRK上的目的片段rPA(K)進行突變,穫得瞭含有突變體rPA(KN)(N184→Q)的真覈錶達載體pCSRKN.酶切和測序結果證明,成功去除瞭184位的糖基化位點.用LipofectamineTM 2000 Reagent將pCSRKN轉染至COS-7細胞,取轉染後不同培養時間上清,以FAPA法進行檢測.結果錶明,錶達產物具有良好的溶圈活性,從而驗證瞭pCSRKN在真覈繫統錶達的可行性.
채용정점돌변기술,대진핵표체재체pCSRK상적목적편단rPA(K)진행돌변,획득료함유돌변체rPA(KN)(N184→Q)적진핵표체재체pCSRKN.매절화측서결과증명,성공거제료184위적당기화위점.용LipofectamineTM 2000 Reagent장pCSRKN전염지COS-7세포,취전염후불동배양시간상청,이FAPA법진행검측.결과표명,표체산물구유량호적용권활성,종이험증료pCSRKN재진핵계통표체적가행성.
