中国兽医学报
中國獸醫學報
중국수의학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
2009年
5期
546-550
,共5页
蒙学莲%景志忠%房永祥%窦永喜%陈国华%贾怀杰%段凤云%才学鹏
矇學蓮%景誌忠%房永祥%竇永喜%陳國華%賈懷傑%段鳳雲%纔學鵬
몽학련%경지충%방영상%두영희%진국화%가부걸%단봉운%재학붕
猪白介素-4%小鼠%重组表达质粒%生物安全性%组织分布%基因组整合%转移和扩散
豬白介素-4%小鼠%重組錶達質粒%生物安全性%組織分佈%基因組整閤%轉移和擴散
저백개소-4%소서%중조표체질립%생물안전성%조직분포%기인조정합%전이화확산
为了探讨pcDNA3.1/IL-4重组表达质粒作为疫苗佐剂进入临床应用的生物安全性,本试验就pcDNA3.1/IL-4重组表达质粒在小鼠体内的组织分布和环境释放安全性进行了研究.将pcDNA3.1/IL-4重组表达质粒经肌肉途径免疫BALB/c小鼠,免疫后不同时间剖杀动物并摘取各种组织,抽提基因组DNA.利用PCR技术分析其在组织内的分布及与细胞基因组发生整合的可能性,同时检测了免疫动物现场环境,以监测pcDNA3.1/IL-4重组表达质粒上的猪IL-4基因、CMV启动子基因和抗性基因是否在环境细菌中发生转移和扩散.结果表明,免疫后1 d在3/3小鼠各组织中仅注射部位肌肉存在重组表达质粒,免疫后5 d仅有1/3小鼠于注射部位肌肉中存在重组表达质粒,免疫后15 d所有小鼠的各组织中无重组表达质粒存在;未发现pcDNA3.1/IL-4重组表达质粒整合到宿主细胞基因组和转化到环境其他细菌中.因此,认为pcDNA3.1/IL-4重组表达质粒对动物和环境是安全的.
為瞭探討pcDNA3.1/IL-4重組錶達質粒作為疫苗佐劑進入臨床應用的生物安全性,本試驗就pcDNA3.1/IL-4重組錶達質粒在小鼠體內的組織分佈和環境釋放安全性進行瞭研究.將pcDNA3.1/IL-4重組錶達質粒經肌肉途徑免疫BALB/c小鼠,免疫後不同時間剖殺動物併摘取各種組織,抽提基因組DNA.利用PCR技術分析其在組織內的分佈及與細胞基因組髮生整閤的可能性,同時檢測瞭免疫動物現場環境,以鑑測pcDNA3.1/IL-4重組錶達質粒上的豬IL-4基因、CMV啟動子基因和抗性基因是否在環境細菌中髮生轉移和擴散.結果錶明,免疫後1 d在3/3小鼠各組織中僅註射部位肌肉存在重組錶達質粒,免疫後5 d僅有1/3小鼠于註射部位肌肉中存在重組錶達質粒,免疫後15 d所有小鼠的各組織中無重組錶達質粒存在;未髮現pcDNA3.1/IL-4重組錶達質粒整閤到宿主細胞基因組和轉化到環境其他細菌中.因此,認為pcDNA3.1/IL-4重組錶達質粒對動物和環境是安全的.
위료탐토pcDNA3.1/IL-4중조표체질립작위역묘좌제진입림상응용적생물안전성,본시험취pcDNA3.1/IL-4중조표체질립재소서체내적조직분포화배경석방안전성진행료연구.장pcDNA3.1/IL-4중조표체질립경기육도경면역BALB/c소서,면역후불동시간부살동물병적취각충조직,추제기인조DNA.이용PCR기술분석기재조직내적분포급여세포기인조발생정합적가능성,동시검측료면역동물현장배경,이감측pcDNA3.1/IL-4중조표체질립상적저IL-4기인、CMV계동자기인화항성기인시부재배경세균중발생전이화확산.결과표명,면역후1 d재3/3소서각조직중부주사부위기육존재중조표체질립,면역후5 d부유1/3소서우주사부위기육중존재중조표체질립,면역후15 d소유소서적각조직중무중조표체질립존재;미발현pcDNA3.1/IL-4중조표체질립정합도숙주세포기인조화전화도배경기타세균중.인차,인위pcDNA3.1/IL-4중조표체질립대동물화배경시안전적.
