中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2009年
13期
14-17
,共4页
王铁东%逄大欣%欧阳红生
王鐵東%逄大訢%歐暘紅生
왕철동%방대흔%구양홍생
猪瘟病毒%猪胚胎成纤维细胞%RNA干扰%逆转录病毒载体
豬瘟病毒%豬胚胎成纖維細胞%RNA榦擾%逆轉錄病毒載體
저온병독%저배태성섬유세포%RNA간우%역전록병독재체
利用针对猪瘟病毒(Classical swine fevervirus,CsFV)石门株Npro基因mRNA的shRNA逆转录病毒表达载体,转导猪胚胎成纤维细胞,在G418的筛选压力下,获得7个稳定整合shRNA表达构件的猪胚胎成纤维细胞株.以100TCID50的CSFV分别感染96孔板内的上述细胞克隆,72h后以对感染细胞克隆进行间接免疫荧光分析及子代病毒滴度检测,结果显示,在所获得的7个抗性细胞株中,有3株细胞上猪瘟病毒的增殖显著降低,表明所构建的针对猪瘟病毒Npro基因mRNA的shRNA逆转录病毒整合细胞基因组后转录产生的siRNA可以有效抑制CSFV的复制.
利用針對豬瘟病毒(Classical swine fevervirus,CsFV)石門株Npro基因mRNA的shRNA逆轉錄病毒錶達載體,轉導豬胚胎成纖維細胞,在G418的篩選壓力下,穫得7箇穩定整閤shRNA錶達構件的豬胚胎成纖維細胞株.以100TCID50的CSFV分彆感染96孔闆內的上述細胞剋隆,72h後以對感染細胞剋隆進行間接免疫熒光分析及子代病毒滴度檢測,結果顯示,在所穫得的7箇抗性細胞株中,有3株細胞上豬瘟病毒的增殖顯著降低,錶明所構建的針對豬瘟病毒Npro基因mRNA的shRNA逆轉錄病毒整閤細胞基因組後轉錄產生的siRNA可以有效抑製CSFV的複製.
이용침대저온병독(Classical swine fevervirus,CsFV)석문주Npro기인mRNA적shRNA역전록병독표체재체,전도저배태성섬유세포,재G418적사선압력하,획득7개은정정합shRNA표체구건적저배태성섬유세포주.이100TCID50적CSFV분별감염96공판내적상술세포극륭,72h후이대감염세포극륭진행간접면역형광분석급자대병독적도검측,결과현시,재소획득적7개항성세포주중,유3주세포상저온병독적증식현저강저,표명소구건적침대저온병독Npro기인mRNA적shRNA역전록병독정합세포기인조후전록산생적siRNA가이유효억제CSFV적복제.
