山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2012年
11期
38-41
,共4页
李莹%王季堃%李巍%吕凤俊%姜一
李瑩%王季堃%李巍%呂鳳俊%薑一
리형%왕계곤%리외%려봉준%강일
重组人p53腺病毒注射液%伊立替康%结肠癌%协同作用%细胞凋亡
重組人p53腺病毒註射液%伊立替康%結腸癌%協同作用%細胞凋亡
중조인p53선병독주사액%이립체강%결장암%협동작용%세포조망
目的 观察重组人p53腺病毒(rAd-p503)注射液、伊立替康(CPT-11)两药单用和联用对结肠癌细胞株HT-29体外增殖、细胞凋亡的影响及可能机制.方法 取对数生长期HT-29细胞随机分为rAd-p53组、CPT-11组、联合组及对照组,其中rAd-p53组分别加入感染剂量(MOI)为50～800的rAd-p53注射液,CPT-11组分别加入质量浓度为10.0～0.1 μg/mL的CPT-11；联合组同时加入上述剂量的rAd-p53注射液和CPT-11,筛选协同作用最佳组为400 MOI rAd-p53注射液+5μg/mL CPT-11；空白组及对照组加入等体积RPMI1640培养基.采用MTT法检测细胞抑制率,流式细胞仪测定细胞周期和凋亡率,Western blot检测Livin蛋白表达,实时荧光定量PCR检测Livin mRNA表达.结果 rAd-p53组、CPT-11组及联合组细胞增殖均受到抑制,细胞凋亡率及G2/M期分布比例均显著高于对照组,Livin mRNA及蛋白表达均显著低于对照组,尤以联合组为著(P＜0.05、0.01),且呈时间-剂量依赖方式.结论 rAd-p53和CPT-11联用可能通过下调Livin mRNA及蛋白表达协同抑制HT-29细胞增殖并诱导其凋亡；此为结肠癌的基因治疗提供了新思路.
目的 觀察重組人p53腺病毒(rAd-p503)註射液、伊立替康(CPT-11)兩藥單用和聯用對結腸癌細胞株HT-29體外增殖、細胞凋亡的影響及可能機製.方法 取對數生長期HT-29細胞隨機分為rAd-p53組、CPT-11組、聯閤組及對照組,其中rAd-p53組分彆加入感染劑量(MOI)為50～800的rAd-p53註射液,CPT-11組分彆加入質量濃度為10.0～0.1 μg/mL的CPT-11；聯閤組同時加入上述劑量的rAd-p53註射液和CPT-11,篩選協同作用最佳組為400 MOI rAd-p53註射液+5μg/mL CPT-11；空白組及對照組加入等體積RPMI1640培養基.採用MTT法檢測細胞抑製率,流式細胞儀測定細胞週期和凋亡率,Western blot檢測Livin蛋白錶達,實時熒光定量PCR檢測Livin mRNA錶達.結果 rAd-p53組、CPT-11組及聯閤組細胞增殖均受到抑製,細胞凋亡率及G2/M期分佈比例均顯著高于對照組,Livin mRNA及蛋白錶達均顯著低于對照組,尤以聯閤組為著(P＜0.05、0.01),且呈時間-劑量依賴方式.結論 rAd-p53和CPT-11聯用可能通過下調Livin mRNA及蛋白錶達協同抑製HT-29細胞增殖併誘導其凋亡；此為結腸癌的基因治療提供瞭新思路.
목적 관찰중조인p53선병독(rAd-p503)주사액、이립체강(CPT-11)량약단용화련용대결장암세포주HT-29체외증식、세포조망적영향급가능궤제.방법 취대수생장기HT-29세포수궤분위rAd-p53조、CPT-11조、연합조급대조조,기중rAd-p53조분별가입감염제량(MOI)위50～800적rAd-p53주사액,CPT-11조분별가입질량농도위10.0～0.1 μg/mL적CPT-11；연합조동시가입상술제량적rAd-p53주사액화CPT-11,사선협동작용최가조위400 MOI rAd-p53주사액+5μg/mL CPT-11；공백조급대조조가입등체적RPMI1640배양기.채용MTT법검측세포억제솔,류식세포의측정세포주기화조망솔,Western blot검측Livin단백표체,실시형광정량PCR검측Livin mRNA표체.결과 rAd-p53조、CPT-11조급연합조세포증식균수도억제,세포조망솔급G2/M기분포비례균현저고우대조조,Livin mRNA급단백표체균현저저우대조조,우이연합조위저(P＜0.05、0.01),차정시간-제량의뢰방식.결론 rAd-p53화CPT-11련용가능통과하조Livin mRNA급단백표체협동억제HT-29세포증식병유도기조망；차위결장암적기인치료제공료신사로.
