实用临床医药杂志
實用臨床醫藥雜誌
실용림상의약잡지
JOURNAL OF JIANGSU CLINICAL MEDICINE
2012年
15期
20-22,31
,共4页
重组人体干细胞因子%原核表达%脐带血体外扩增
重組人體榦細胞因子%原覈錶達%臍帶血體外擴增
중조인체간세포인자%원핵표체%제대혈체외확증
目的 对重组人体干细胞因子(rhSCF)蛋白在脐带血干细胞体外扩增中的作用进行研究.方法 通过大肠杆菌表达系统,经IPTG诱导表达获取SCF包涵体,经透析复性、纯化后获得蛋白.从脐带血中提取单核细胞(MNC),分选其中具有CD34+抗原表位的细胞,使用一定浓度的血小板生成素(TPO)、FLT -3配体(FL)及rhSCF组合对脐带血干细胞进行7d体外扩增以研究rhSCF的作用.结果 成功使用IPTG在大肠杆菌BL21诱导表达rhSCF,包涵体经复性及CM - Sepharose纯化获得高纯度的rhSCF.干细胞体外扩增实验表明rhSCF、FL及TPO联用,具有协同刺激CD34+细胞体外扩增的作用.结论 成功建立rhSCF原核表达、复性和纯化体系,为造血干细胞体外扩增体系的优化研究奠定了基础,同时为干细胞因子的临床应用提供了有价值的参考.
目的 對重組人體榦細胞因子(rhSCF)蛋白在臍帶血榦細胞體外擴增中的作用進行研究.方法 通過大腸桿菌錶達繫統,經IPTG誘導錶達穫取SCF包涵體,經透析複性、純化後穫得蛋白.從臍帶血中提取單覈細胞(MNC),分選其中具有CD34+抗原錶位的細胞,使用一定濃度的血小闆生成素(TPO)、FLT -3配體(FL)及rhSCF組閤對臍帶血榦細胞進行7d體外擴增以研究rhSCF的作用.結果 成功使用IPTG在大腸桿菌BL21誘導錶達rhSCF,包涵體經複性及CM - Sepharose純化穫得高純度的rhSCF.榦細胞體外擴增實驗錶明rhSCF、FL及TPO聯用,具有協同刺激CD34+細胞體外擴增的作用.結論 成功建立rhSCF原覈錶達、複性和純化體繫,為造血榦細胞體外擴增體繫的優化研究奠定瞭基礎,同時為榦細胞因子的臨床應用提供瞭有價值的參攷.
목적 대중조인체간세포인자(rhSCF)단백재제대혈간세포체외확증중적작용진행연구.방법 통과대장간균표체계통,경IPTG유도표체획취SCF포함체,경투석복성、순화후획득단백.종제대혈중제취단핵세포(MNC),분선기중구유CD34+항원표위적세포,사용일정농도적혈소판생성소(TPO)、FLT -3배체(FL)급rhSCF조합대제대혈간세포진행7d체외확증이연구rhSCF적작용.결과 성공사용IPTG재대장간균BL21유도표체rhSCF,포함체경복성급CM - Sepharose순화획득고순도적rhSCF.간세포체외확증실험표명rhSCF、FL급TPO련용,구유협동자격CD34+세포체외확증적작용.결론 성공건립rhSCF원핵표체、복성화순화체계,위조혈간세포체외확증체계적우화연구전정료기출,동시위간세포인자적림상응용제공료유개치적삼고.
