中华医学遗传学杂志
中華醫學遺傳學雜誌
중화의학유전학잡지
CHINESE JOURNAL OF MEDICAL GENETICS
2002年
5期
412-415
,共4页
张昭秀%吕联煌%兰小鹏%胡建达%林敏辉%景全胜
張昭秀%呂聯煌%蘭小鵬%鬍建達%林敏輝%景全勝
장소수%려련황%란소붕%호건체%림민휘%경전성
实时荧光定量%反转录聚合酶链反应%bcl-2基因
實時熒光定量%反轉錄聚閤酶鏈反應%bcl-2基因
실시형광정량%반전록취합매련반응%bcl-2기인
目的建立实时荧光定量反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)法检测bcl-2基因mRNA表达.方法应用T-A克隆技术构建含bcl-2基因的载体作为标准模板,采用荧光Taq man方法及探针标记技术,建立实时荧光定量RT-PCR方法,制备标准曲线,检测bcl-2反义核酸治疗前后人类Burkitt's淋巴瘤裸鼠模型中瘤细胞的bcl-2 mRNA表达水平变化,并与半定量RT-PCR检测结果进行比较.结果实时荧光定量RT-PCR检测bcl-2反义核酸治疗组的瘤细胞bcl-2 mRNA表达明显降低,而bcl-2无义核酸对照组及空白对照组的瘤细胞bcl-2 mRNA表达仍较高,且显示无义核酸对照组与空白对照组的bcl-2 mRNA表达水平相近.半定量RT-PCR结果显示bcl-2出现类似的变化趋势.结论所建立的实时荧光定量RT-PCR用于检测bcl-2 mRNA表达,结果用拷贝数表示,比半定量RT-PCR更灵敏、准确.
目的建立實時熒光定量反轉錄聚閤酶鏈反應(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)法檢測bcl-2基因mRNA錶達.方法應用T-A剋隆技術構建含bcl-2基因的載體作為標準模闆,採用熒光Taq man方法及探針標記技術,建立實時熒光定量RT-PCR方法,製備標準麯線,檢測bcl-2反義覈痠治療前後人類Burkitt's淋巴瘤裸鼠模型中瘤細胞的bcl-2 mRNA錶達水平變化,併與半定量RT-PCR檢測結果進行比較.結果實時熒光定量RT-PCR檢測bcl-2反義覈痠治療組的瘤細胞bcl-2 mRNA錶達明顯降低,而bcl-2無義覈痠對照組及空白對照組的瘤細胞bcl-2 mRNA錶達仍較高,且顯示無義覈痠對照組與空白對照組的bcl-2 mRNA錶達水平相近.半定量RT-PCR結果顯示bcl-2齣現類似的變化趨勢.結論所建立的實時熒光定量RT-PCR用于檢測bcl-2 mRNA錶達,結果用拷貝數錶示,比半定量RT-PCR更靈敏、準確.
목적건립실시형광정량반전록취합매련반응(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)법검측bcl-2기인mRNA표체.방법응용T-A극륭기술구건함bcl-2기인적재체작위표준모판,채용형광Taq man방법급탐침표기기술,건립실시형광정량RT-PCR방법,제비표준곡선,검측bcl-2반의핵산치료전후인류Burkitt's림파류라서모형중류세포적bcl-2 mRNA표체수평변화,병여반정량RT-PCR검측결과진행비교.결과실시형광정량RT-PCR검측bcl-2반의핵산치료조적류세포bcl-2 mRNA표체명현강저,이bcl-2무의핵산대조조급공백대조조적류세포bcl-2 mRNA표체잉교고,차현시무의핵산대조조여공백대조조적bcl-2 mRNA표체수평상근.반정량RT-PCR결과현시bcl-2출현유사적변화추세.결론소건립적실시형광정량RT-PCR용우검측bcl-2 mRNA표체,결과용고패수표시,비반정량RT-PCR경령민、준학.
