CAJ | 학술논문

目的了解人肝胚瘤细胞株Hep G2和稳定转染HBV全基因组细胞株HepG2.2.15的干扰素(IFN)抗病毒基因表达谱.方法选择与IFN抗病毒及其信号转导途径相关的288个IMAGE克隆,经聚合酶链反应(PCR)扩增相应的基因片段,将扩增的DNA片段纯化后点样于阳离子尼龙膜上以制备成人工芯片.Hep G2和HepG2.2.15细胞经IFN处理后,分离细胞总RNA,进行逆转录并且同时以32P标记;将标记的cDNA靶基因与尼龙膜上的探针进行分子杂交.经Cyclone扫描系统和OptiQuantTM软件处理,将图像信号转换成数据信息;再经Excel软件分析、处理形成Macroarray数据值.结果Macroarray分析提示,在Hep G2和HepG2.2.15细胞仅有部分IFN诱导基因表达,多数IFN诱导基因呈低表达或不表达.通过比较Hep G2和HepG2.2.15细胞,发现两者表达IFN诱导基因有差异,即对IFN应答有差异.进一步分析还发现,尽管与Hep G2细胞存在差异的IFN应答,HepG2.2.15细胞的IFN信号转导途径(Jak-STAT途径)却是开放的、未受损伤的.结论Hep G2和HepG2.2.15细胞具有差异的IFN抗病毒基因表达谱.
목적료해인간배류세포주Hep G2화은정전염HBV전기인조세포주HepG2.2.15적간우소(IFN)항병독기인표체보.방법선택여IFN항병독급기신호전도도경상관적288개IMAGE극륭,경취합매련반응(PCR)확증상응적기인편단,장확증적DNA편단순화후점양우양리자니룡막상이제비성인공심편.Hep G2화HepG2.2.15세포경IFN처리후,분리세포총RNA,진행역전록병차동시이32P표기;장표기적cDNA파기인여니룡막상적탐침진행분자잡교.경Cyclone소묘계통화OptiQuantTM연건처리,장도상신호전환성수거신식;재경Excel연건분석、처리형성Macroarray수거치.결과Macroarray분석제시,재Hep G2화HepG2.2.15세포부유부분IFN유도기인표체,다수IFN유도기인정저표체혹불표체.통과비교Hep G2화HepG2.2.15세포,발현량자표체IFN유도기인유차이,즉대IFN응답유차이.진일보분석환발현,진관여Hep G2세포존재차이적IFN응답,HepG2.2.15세포적IFN신호전도도경(Jak-STAT도경)각시개방적、미수손상적.결론Hep G2화HepG2.2.15세포구유차이적IFN항병독기인표체보.