中华儿科杂志
中華兒科雜誌
중화인과잡지
Chinese Journal of Pediatrics
2007年
5期
334-338
,共5页
兰志建%汤永民%沈红强%钱柏芹%宁铂涛%陈英虎
蘭誌建%湯永民%瀋紅彊%錢柏芹%寧鉑濤%陳英虎
란지건%탕영민%침홍강%전백근%저박도%진영호
白血病%细胞膜%荧光素类%P糖蛋白%维拉帕米%环孢菌素
白血病%細胞膜%熒光素類%P糖蛋白%維拉帕米%環孢菌素
백혈병%세포막%형광소류%P당단백%유랍파미%배포균소
目的 通过荧光染料Calcein-AM(C-AM)在K562及其耐长春新碱(VCR)的细胞系K562/VCR细胞中的变化以及异搏定(VER)、环孢霉素A(CSA)对C-AM在K562和K562/VCR细胞中摄取与排出的影响,研究C-AM在评价P-gp泵功能的作用,评价两种逆转剂的逆转作用,为临床合理应用逆转剂提供实验依据.方法 以K562及K562/VCR为实验对象,以流式细胞术测定两种细胞系内不同时间点(0、30、60、90和120 min)的C-AM荧光强度来反映P-gp泵功能以及CSA、VER对其的影响.结果 C-AM在K562和K562/VCR细胞中的变化以24 h内最为明显,24 h后K562细胞和K562/VCR细胞内C-AM荧光强度分别下降至14.57%和15.64%.其在K562细胞内各时间点的平均荧光强度(MFI)明显高于K562/VCR细胞(各时间点差异P值均＜0.05);CSA、VER和CSA+VER对K562细胞内C-AM的摄取和外排无明显影响,但各组逆转剂、C-AM与细胞共孵育120 min后,对照组、CSA、VER和CSA+VER组的K562/VCR细胞MFI分别为3251±106.7、4014±219.0、3879±116.1和4158±302.6,与对照组相比,后三组细胞对CAM的摄取明显增加(P均＜0.05).当外排120 min后,对照组、CSA、VER和CSA+VER组的K562/VCR细胞MFI分别为1622±191.0、2237±155.2、1932±233.0和2231±146.7,与对照组相比,后三组的CAM残余量也明显增加(P均＜0.05),表明CSA、VER和CSA+VER能增加K562/VCR细胞对C-AM的摄取和减少细胞内C-AM的外排.结论 P-gp的表达能减少K562/VCR细胞对C-AM的摄取和增加其对C-AM外排,逆转剂CSA与VER的联合应用对K562/VCR细胞摄取和外排C-AM的影响并不比单独使用CSA或VER明显,通过使用C-AM和流式细胞术,可以比较迅速、简便评价白血病细胞P-gp的泵功能以及逆转剂的逆转作用.
目的 通過熒光染料Calcein-AM(C-AM)在K562及其耐長春新堿(VCR)的細胞繫K562/VCR細胞中的變化以及異搏定(VER)、環孢黴素A(CSA)對C-AM在K562和K562/VCR細胞中攝取與排齣的影響,研究C-AM在評價P-gp泵功能的作用,評價兩種逆轉劑的逆轉作用,為臨床閤理應用逆轉劑提供實驗依據.方法 以K562及K562/VCR為實驗對象,以流式細胞術測定兩種細胞繫內不同時間點(0、30、60、90和120 min)的C-AM熒光彊度來反映P-gp泵功能以及CSA、VER對其的影響.結果 C-AM在K562和K562/VCR細胞中的變化以24 h內最為明顯,24 h後K562細胞和K562/VCR細胞內C-AM熒光彊度分彆下降至14.57%和15.64%.其在K562細胞內各時間點的平均熒光彊度(MFI)明顯高于K562/VCR細胞(各時間點差異P值均＜0.05);CSA、VER和CSA+VER對K562細胞內C-AM的攝取和外排無明顯影響,但各組逆轉劑、C-AM與細胞共孵育120 min後,對照組、CSA、VER和CSA+VER組的K562/VCR細胞MFI分彆為3251±106.7、4014±219.0、3879±116.1和4158±302.6,與對照組相比,後三組細胞對CAM的攝取明顯增加(P均＜0.05).噹外排120 min後,對照組、CSA、VER和CSA+VER組的K562/VCR細胞MFI分彆為1622±191.0、2237±155.2、1932±233.0和2231±146.7,與對照組相比,後三組的CAM殘餘量也明顯增加(P均＜0.05),錶明CSA、VER和CSA+VER能增加K562/VCR細胞對C-AM的攝取和減少細胞內C-AM的外排.結論 P-gp的錶達能減少K562/VCR細胞對C-AM的攝取和增加其對C-AM外排,逆轉劑CSA與VER的聯閤應用對K562/VCR細胞攝取和外排C-AM的影響併不比單獨使用CSA或VER明顯,通過使用C-AM和流式細胞術,可以比較迅速、簡便評價白血病細胞P-gp的泵功能以及逆轉劑的逆轉作用.
목적 통과형광염료Calcein-AM(C-AM)재K562급기내장춘신감(VCR)적세포계K562/VCR세포중적변화이급이박정(VER)、배포매소A(CSA)대C-AM재K562화K562/VCR세포중섭취여배출적영향,연구C-AM재평개P-gp빙공능적작용,평개량충역전제적역전작용,위림상합리응용역전제제공실험의거.방법 이K562급K562/VCR위실험대상,이류식세포술측정량충세포계내불동시간점(0、30、60、90화120 min)적C-AM형광강도래반영P-gp빙공능이급CSA、VER대기적영향.결과 C-AM재K562화K562/VCR세포중적변화이24 h내최위명현,24 h후K562세포화K562/VCR세포내C-AM형광강도분별하강지14.57%화15.64%.기재K562세포내각시간점적평균형광강도(MFI)명현고우K562/VCR세포(각시간점차이P치균＜0.05);CSA、VER화CSA+VER대K562세포내C-AM적섭취화외배무명현영향,단각조역전제、C-AM여세포공부육120 min후,대조조、CSA、VER화CSA+VER조적K562/VCR세포MFI분별위3251±106.7、4014±219.0、3879±116.1화4158±302.6,여대조조상비,후삼조세포대CAM적섭취명현증가(P균＜0.05).당외배120 min후,대조조、CSA、VER화CSA+VER조적K562/VCR세포MFI분별위1622±191.0、2237±155.2、1932±233.0화2231±146.7,여대조조상비,후삼조적CAM잔여량야명현증가(P균＜0.05),표명CSA、VER화CSA+VER능증가K562/VCR세포대C-AM적섭취화감소세포내C-AM적외배.결론 P-gp적표체능감소K562/VCR세포대C-AM적섭취화증가기대C-AM외배,역전제CSA여VER적연합응용대K562/VCR세포섭취화외배C-AM적영향병불비단독사용CSA혹VER명현,통과사용C-AM화류식세포술,가이비교신속、간편평개백혈병세포P-gp적빙공능이급역전제적역전작용.
