生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2012年
4期
476-480
,共5页
江为%靳彦文%刘萱%曹诚
江為%靳彥文%劉萱%曹誠
강위%근언문%류훤%조성
人乳头瘤病毒%衣壳蛋白L1%表达
人乳頭瘤病毒%衣殼蛋白L1%錶達
인유두류병독%의각단백L1%표체
目的:通过昆虫-杆状病毒表达系统获得人乳头瘤病毒(HPV)16/18/33/58亚型的主要衣壳蛋白L1.方法:克隆了HPV16/18/33/58亚型的L1蛋白基因,并采用密码子优化策略进行改造(记为HPV16/18/33/58亚型mL1),将优化基因片段插入pFastBac Dual载体获得重组载体,转化大肠杆菌DH10Bac感受态细胞后得到重组Bacmid,转染昆虫Sf9细胞,Western印迹和SDS-PAGE检测重组蛋白的表达.结果:获得了表达HPV16/18/33/58亚型mL1蛋白的重组杆状病毒；Western印迹和SDS-PAGE分析表明该重组杆状病毒感染昆虫Sf9细胞后表达mL1蛋白,且mL1蛋白主要分布在细胞中；优化了蛋白表达时间和感染复数,获得目的蛋白mL1的高效表达.结论:多个亚型HPV L1蛋白的克隆表达,为中国优势血清型疫苗的研制奠定了基础.
目的:通過昆蟲-桿狀病毒錶達繫統穫得人乳頭瘤病毒(HPV)16/18/33/58亞型的主要衣殼蛋白L1.方法:剋隆瞭HPV16/18/33/58亞型的L1蛋白基因,併採用密碼子優化策略進行改造(記為HPV16/18/33/58亞型mL1),將優化基因片段插入pFastBac Dual載體穫得重組載體,轉化大腸桿菌DH10Bac感受態細胞後得到重組Bacmid,轉染昆蟲Sf9細胞,Western印跡和SDS-PAGE檢測重組蛋白的錶達.結果:穫得瞭錶達HPV16/18/33/58亞型mL1蛋白的重組桿狀病毒；Western印跡和SDS-PAGE分析錶明該重組桿狀病毒感染昆蟲Sf9細胞後錶達mL1蛋白,且mL1蛋白主要分佈在細胞中；優化瞭蛋白錶達時間和感染複數,穫得目的蛋白mL1的高效錶達.結論:多箇亞型HPV L1蛋白的剋隆錶達,為中國優勢血清型疫苗的研製奠定瞭基礎.
목적:통과곤충-간상병독표체계통획득인유두류병독(HPV)16/18/33/58아형적주요의각단백L1.방법:극륭료HPV16/18/33/58아형적L1단백기인,병채용밀마자우화책략진행개조(기위HPV16/18/33/58아형mL1),장우화기인편단삽입pFastBac Dual재체획득중조재체,전화대장간균DH10Bac감수태세포후득도중조Bacmid,전염곤충Sf9세포,Western인적화SDS-PAGE검측중조단백적표체.결과:획득료표체HPV16/18/33/58아형mL1단백적중조간상병독；Western인적화SDS-PAGE분석표명해중조간상병독감염곤충Sf9세포후표체mL1단백,차mL1단백주요분포재세포중；우화료단백표체시간화감염복수,획득목적단백mL1적고효표체.결론:다개아형HPV L1단백적극륭표체,위중국우세혈청형역묘적연제전정료기출.
