医学信息（下旬刊）
醫學信息（下旬刊）
의학신식（하순간）
MEDICAL INFORMATION
2011年
10期
33-34
,共2页
顾翠英%王静%韩志芬%曹红平%夏花英%金国琴
顧翠英%王靜%韓誌芬%曹紅平%夏花英%金國琴
고취영%왕정%한지분%조홍평%하화영%금국금
D-半乳糖%小鼠皮肤成纤维细胞模型%氧化损伤
D-半乳糖%小鼠皮膚成纖維細胞模型%氧化損傷
D-반유당%소서피부성섬유세포모형%양화손상
目的:建立D-半乳糖(D-gal)致体外培养的小鼠皮肤成纤维细胞(MSFs)损伤模型,为研究增生性瘢痕和皮肤衰老等提供实验依据.方法:原代培养KM乳鼠皮肤成纤维细胞,先用免疫细胞化学技术(SABC)法特异染色波形蛋白作细胞鉴定,然后采用10g/L的D-gal作用于细胞,培养一定时间制作MSFs损伤模型.苏木精-伊红(HE)染色观察MSFs形态变化;四甲基氮唑兰(MTT)法测定MSFs活性;试剂盒法检测MSFs培养液中超氧化物歧化酶(SOD)的活性、丙二醛(MDA)含量和乳酸脱氢酶(LDH)活性;β-半乳糖苷酶(β-Gal)染色观察模型细胞的酶活性.结果:经SABC法特异鉴定培养细胞为MSFs,D-gal处理细胞24h后,与正常对照组比较,MSFs形态发生显著变化,MSFs活性明显下降;MSFs的SOD活力明显下降(P＜0.01),而MDA含量和LDH活性显著上升(P＜0.01);模型细胞培养72h后,β-Gal活性增高.结论:浓度为10g/L的D-gal作用MSFs 24 h后,对细胞具有明显氧化损伤作用,且在48 h内模型细胞稳定,72h后模型细胞出现衰老生物学标志.该模型细胞为今后开展相关研究提供了实验细胞平台.
目的:建立D-半乳糖(D-gal)緻體外培養的小鼠皮膚成纖維細胞(MSFs)損傷模型,為研究增生性瘢痕和皮膚衰老等提供實驗依據.方法:原代培養KM乳鼠皮膚成纖維細胞,先用免疫細胞化學技術(SABC)法特異染色波形蛋白作細胞鑒定,然後採用10g/L的D-gal作用于細胞,培養一定時間製作MSFs損傷模型.囌木精-伊紅(HE)染色觀察MSFs形態變化;四甲基氮唑蘭(MTT)法測定MSFs活性;試劑盒法檢測MSFs培養液中超氧化物歧化酶(SOD)的活性、丙二醛(MDA)含量和乳痠脫氫酶(LDH)活性;β-半乳糖苷酶(β-Gal)染色觀察模型細胞的酶活性.結果:經SABC法特異鑒定培養細胞為MSFs,D-gal處理細胞24h後,與正常對照組比較,MSFs形態髮生顯著變化,MSFs活性明顯下降;MSFs的SOD活力明顯下降(P＜0.01),而MDA含量和LDH活性顯著上升(P＜0.01);模型細胞培養72h後,β-Gal活性增高.結論:濃度為10g/L的D-gal作用MSFs 24 h後,對細胞具有明顯氧化損傷作用,且在48 h內模型細胞穩定,72h後模型細胞齣現衰老生物學標誌.該模型細胞為今後開展相關研究提供瞭實驗細胞平檯.
목적:건립D-반유당(D-gal)치체외배양적소서피부성섬유세포(MSFs)손상모형,위연구증생성반흔화피부쇠로등제공실험의거.방법:원대배양KM유서피부성섬유세포,선용면역세포화학기술(SABC)법특이염색파형단백작세포감정,연후채용10g/L적D-gal작용우세포,배양일정시간제작MSFs손상모형.소목정-이홍(HE)염색관찰MSFs형태변화;사갑기담서란(MTT)법측정MSFs활성;시제합법검측MSFs배양액중초양화물기화매(SOD)적활성、병이철(MDA)함량화유산탈경매(LDH)활성;β-반유당감매(β-Gal)염색관찰모형세포적매활성.결과:경SABC법특이감정배양세포위MSFs,D-gal처리세포24h후,여정상대조조비교,MSFs형태발생현저변화,MSFs활성명현하강;MSFs적SOD활력명현하강(P＜0.01),이MDA함량화LDH활성현저상승(P＜0.01);모형세포배양72h후,β-Gal활성증고.결론:농도위10g/L적D-gal작용MSFs 24 h후,대세포구유명현양화손상작용,차재48 h내모형세포은정,72h후모형세포출현쇠로생물학표지.해모형세포위금후개전상관연구제공료실험세포평태.
