工业微生物
工業微生物
공업미생물
INDUSTRIAL MICROBIOLOGY
2011年
4期
8-15
,共8页
周兴%韦星明%杨祥开%郑元涛%许黎明%黄日波
週興%韋星明%楊祥開%鄭元濤%許黎明%黃日波
주흥%위성명%양상개%정원도%허려명%황일파
大黄欧文氏菌%蔗糖异构酶%酶学特性%异麦芽酮糖%海藻酮糖
大黃歐文氏菌%蔗糖異構酶%酶學特性%異麥芽酮糖%海藻酮糖
대황구문씨균%자당이구매%매학특성%이맥아동당%해조동당
通过PCR克隆得到了不包括信号肽序列的109～1803 bp大黄欧文氏菌蔗糖异构酶基因,以pQE30为表达载体可以在大肠杆菌中高效表达SI基因,但容易形成包涵体.通过降低诱导剂IPTG至10 μmol/L,28 ℃低温诱导表达可以改进表达产物的可溶性.重组SI的最适pH为6.0,最适反应温度为30 ℃.测定的Km为46.8 mmol/L,Vmax为152.2 U/mg.重组SI对麦芽糖、海藻糖、棉子糖、三氯蔗糖及α-甲基葡萄糖苷等均不起作用,只利用蔗糖为底物转糖苷,也可以水解对硝基苯酚-α-葡萄糖苷.同时发现重组SI具有转化异麦芽酮糖生成海藻酮糖的活性.
通過PCR剋隆得到瞭不包括信號肽序列的109～1803 bp大黃歐文氏菌蔗糖異構酶基因,以pQE30為錶達載體可以在大腸桿菌中高效錶達SI基因,但容易形成包涵體.通過降低誘導劑IPTG至10 μmol/L,28 ℃低溫誘導錶達可以改進錶達產物的可溶性.重組SI的最適pH為6.0,最適反應溫度為30 ℃.測定的Km為46.8 mmol/L,Vmax為152.2 U/mg.重組SI對麥芽糖、海藻糖、棉子糖、三氯蔗糖及α-甲基葡萄糖苷等均不起作用,隻利用蔗糖為底物轉糖苷,也可以水解對硝基苯酚-α-葡萄糖苷.同時髮現重組SI具有轉化異麥芽酮糖生成海藻酮糖的活性.
통과PCR극륭득도료불포괄신호태서렬적109～1803 bp대황구문씨균자당이구매기인,이pQE30위표체재체가이재대장간균중고효표체SI기인,단용역형성포함체.통과강저유도제IPTG지10 μmol/L,28 ℃저온유도표체가이개진표체산물적가용성.중조SI적최괄pH위6.0,최괄반응온도위30 ℃.측정적Km위46.8 mmol/L,Vmax위152.2 U/mg.중조SI대맥아당、해조당、면자당、삼록자당급α-갑기포도당감등균불기작용,지이용자당위저물전당감,야가이수해대초기분분-α-포도당감.동시발현중조SI구유전화이맥아동당생성해조동당적활성.
