中国比较医学杂志
中國比較醫學雜誌
중국비교의학잡지
CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE
2011年
1期
54-58
,共5页
李明岳%鲍世韵%刘嘉林%郑锦锋%林宝行%余小舫
李明嶽%鮑世韻%劉嘉林%鄭錦鋒%林寶行%餘小舫
리명악%포세운%류가림%정금봉%림보행%여소방
组蛋白修饰%H3K4m3%H3K9m3%MafA基因%分化
組蛋白脩飾%H3K4m3%H3K9m3%MafA基因%分化
조단백수식%H3K4m3%H3K9m3%MafA기인%분화
目的 通过比较不同细胞类型之间MafA基因转录起始区的组蛋白修饰差异,探讨组蛋白修饰对MafA基因转录表达的作用.方法 采用染色质免疫共沉淀一实时定量PCR法检测小鼠胰岛素瘤β细胞(NIT-1)、NIH小鼠成纤维细胞(NIH3T3)及小鼠胚胎干细胞(mES)三者中的MafA和MLH1基因转录起始区组蛋白修饰(H3K4m3、H3K9m3和H3乙酰化)的状况.同时采用实时定量RT-PCR检测上述三种细胞各基因mRNA表达水平.分析基因的H3K4m3、H3K9m3和H3乙酰化修饰与基因表达之间的相互关系.结果 (1)以mES细胞为参照,NIT-1细胞MafA基因的转录起始区的H3K4m3修饰水平明显增高(P＜0.05),H3K9m3修饰水平明显降低(P＜0.05);NIH 3T3细胞MafA基因的转录起始区的H3K9m3修饰水平明显增高(P＜0.05),H3K4m3修饰水平明显降低(P＜0.05);(2)MafA基因的仅在NIT-1细胞表达,其表达与H3K4m3修饰存在直线相关(相关系数0.995);与H3K9m3修饰存在直线负相关(相关系数-0.751);(3)管家基因MLH1的表达与所检测组蛋白修饰无相关性.结论 H3K9m3与H3K4m3修饰能相互协调,共同调控MafA基因的表达,对胚胎干细胞向β细胞分化具有重要的意义.
目的 通過比較不同細胞類型之間MafA基因轉錄起始區的組蛋白脩飾差異,探討組蛋白脩飾對MafA基因轉錄錶達的作用.方法 採用染色質免疫共沉澱一實時定量PCR法檢測小鼠胰島素瘤β細胞(NIT-1)、NIH小鼠成纖維細胞(NIH3T3)及小鼠胚胎榦細胞(mES)三者中的MafA和MLH1基因轉錄起始區組蛋白脩飾(H3K4m3、H3K9m3和H3乙酰化)的狀況.同時採用實時定量RT-PCR檢測上述三種細胞各基因mRNA錶達水平.分析基因的H3K4m3、H3K9m3和H3乙酰化脩飾與基因錶達之間的相互關繫.結果 (1)以mES細胞為參照,NIT-1細胞MafA基因的轉錄起始區的H3K4m3脩飾水平明顯增高(P＜0.05),H3K9m3脩飾水平明顯降低(P＜0.05);NIH 3T3細胞MafA基因的轉錄起始區的H3K9m3脩飾水平明顯增高(P＜0.05),H3K4m3脩飾水平明顯降低(P＜0.05);(2)MafA基因的僅在NIT-1細胞錶達,其錶達與H3K4m3脩飾存在直線相關(相關繫數0.995);與H3K9m3脩飾存在直線負相關(相關繫數-0.751);(3)管傢基因MLH1的錶達與所檢測組蛋白脩飾無相關性.結論 H3K9m3與H3K4m3脩飾能相互協調,共同調控MafA基因的錶達,對胚胎榦細胞嚮β細胞分化具有重要的意義.
목적 통과비교불동세포류형지간MafA기인전록기시구적조단백수식차이,탐토조단백수식대MafA기인전록표체적작용.방법 채용염색질면역공침정일실시정량PCR법검측소서이도소류β세포(NIT-1)、NIH소서성섬유세포(NIH3T3)급소서배태간세포(mES)삼자중적MafA화MLH1기인전록기시구조단백수식(H3K4m3、H3K9m3화H3을선화)적상황.동시채용실시정량RT-PCR검측상술삼충세포각기인mRNA표체수평.분석기인적H3K4m3、H3K9m3화H3을선화수식여기인표체지간적상호관계.결과 (1)이mES세포위삼조,NIT-1세포MafA기인적전록기시구적H3K4m3수식수평명현증고(P＜0.05),H3K9m3수식수평명현강저(P＜0.05);NIH 3T3세포MafA기인적전록기시구적H3K9m3수식수평명현증고(P＜0.05),H3K4m3수식수평명현강저(P＜0.05);(2)MafA기인적부재NIT-1세포표체,기표체여H3K4m3수식존재직선상관(상관계수0.995);여H3K9m3수식존재직선부상관(상관계수-0.751);(3)관가기인MLH1적표체여소검측조단백수식무상관성.결론 H3K9m3여H3K4m3수식능상호협조,공동조공MafA기인적표체,대배태간세포향β세포분화구유중요적의의.
