中国临床神经科学
中國臨床神經科學
중국림상신경과학
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL NEUROSCIENCES
2010年
2期
113-118
,共6页
罗国刚%雷莉%樊文静%吕社民%徐仓宝
囉國剛%雷莉%樊文靜%呂社民%徐倉寶
라국강%뢰리%번문정%려사민%서창보
降钙素基因相关肽%三叉神经节%离体培养%信号转导
降鈣素基因相關肽%三扠神經節%離體培養%信號轉導
강개소기인상관태%삼차신경절%리체배양%신호전도
目的:探讨大鼠三叉神经节(TG)离体培养后降钙素基因相关肽(CGRP)表达增高的细胞内信号转导通路.方法: 成年雄性SD大鼠TG在DMEM培养液离体培养12、24和48 h,应用免疫组化和实时定量PCR法分别检测CGRP阳性细胞数和mRNA表达水平变化.在培养液中分别加入一定浓度的炎症抑制剂地塞米松、转录水平特异性抑制剂放线菌素D、蛋白翻译水平特异性抑制剂环己酰胺,以及细胞内丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号转导系统ERK1/2、JNK、P38的3条信号通路上关键激酶的特异性阻断剂U0126、SP600125、SB239063与三叉神经节共同培养24 h,免疫组化和实时定量PCR法分别检测CGRP阳性反应细胞数和mRNA表达水平变化.结果: TG离体培养后12、24和48 h后CGRP阳性反应细胞数、平均吸光度和累积吸光度值均比新鲜组织明显增高,CGRP mRNA表达水平也明显增高.浓度为1×10-5 mol·L-1的地塞米松、放线菌素D、环己酰胺以及U0126、SP600125分别与三叉神经节共同孵育24 h后,CGRP mRNA表达水平都显著降低.结论: TG离体培养后CGRP表达水平增高是通过细胞核内转录因子上调mRNA转录和蛋白翻译水平,是TG内非特异性炎症反应的结果,细胞内MAPK信号转导的ERK1/2通路和JNK信号通路参与了上调过程.
目的:探討大鼠三扠神經節(TG)離體培養後降鈣素基因相關肽(CGRP)錶達增高的細胞內信號轉導通路.方法: 成年雄性SD大鼠TG在DMEM培養液離體培養12、24和48 h,應用免疫組化和實時定量PCR法分彆檢測CGRP暘性細胞數和mRNA錶達水平變化.在培養液中分彆加入一定濃度的炎癥抑製劑地塞米鬆、轉錄水平特異性抑製劑放線菌素D、蛋白翻譯水平特異性抑製劑環己酰胺,以及細胞內絲裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信號轉導繫統ERK1/2、JNK、P38的3條信號通路上關鍵激酶的特異性阻斷劑U0126、SP600125、SB239063與三扠神經節共同培養24 h,免疫組化和實時定量PCR法分彆檢測CGRP暘性反應細胞數和mRNA錶達水平變化.結果: TG離體培養後12、24和48 h後CGRP暘性反應細胞數、平均吸光度和纍積吸光度值均比新鮮組織明顯增高,CGRP mRNA錶達水平也明顯增高.濃度為1×10-5 mol·L-1的地塞米鬆、放線菌素D、環己酰胺以及U0126、SP600125分彆與三扠神經節共同孵育24 h後,CGRP mRNA錶達水平都顯著降低.結論: TG離體培養後CGRP錶達水平增高是通過細胞覈內轉錄因子上調mRNA轉錄和蛋白翻譯水平,是TG內非特異性炎癥反應的結果,細胞內MAPK信號轉導的ERK1/2通路和JNK信號通路參與瞭上調過程.
목적:탐토대서삼차신경절(TG)리체배양후강개소기인상관태(CGRP)표체증고적세포내신호전도통로.방법: 성년웅성SD대서TG재DMEM배양액리체배양12、24화48 h,응용면역조화화실시정량PCR법분별검측CGRP양성세포수화mRNA표체수평변화.재배양액중분별가입일정농도적염증억제제지새미송、전록수평특이성억제제방선균소D、단백번역수평특이성억제제배기선알,이급세포내사렬원격활적단백격매(MAPK)신호전도계통ERK1/2、JNK、P38적3조신호통로상관건격매적특이성조단제U0126、SP600125、SB239063여삼차신경절공동배양24 h,면역조화화실시정량PCR법분별검측CGRP양성반응세포수화mRNA표체수평변화.결과: TG리체배양후12、24화48 h후CGRP양성반응세포수、평균흡광도화루적흡광도치균비신선조직명현증고,CGRP mRNA표체수평야명현증고.농도위1×10-5 mol·L-1적지새미송、방선균소D、배기선알이급U0126、SP600125분별여삼차신경절공동부육24 h후,CGRP mRNA표체수평도현저강저.결론: TG리체배양후CGRP표체수평증고시통과세포핵내전록인자상조mRNA전록화단백번역수평,시TG내비특이성염증반응적결과,세포내MAPK신호전도적ERK1/2통로화JNK신호통로삼여료상조과정.